- 1、本文档共10页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
*细胞活体染色技术*实验目的学习细胞活体染色的方法。观察动、植物活细胞内线粒体,液泡系的形态、数量与分布。细胞膜结构*实验原理*一般的生物材料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后,细胞膜被破坏,染料才能进入细胞内部。但是,有一些染料(称“活体染料”)却能进入活细胞,它们是一些无毒或毒性很小的染色剂,能使细胞中某些特定结构着色。活体染料基本上不影响或很少影响细胞的生命活动。活染法弥补了活观察法不能显示细胞精细结构的不足,也避免了固定染色法对细胞结构的破环和造成人为假象的弊病。遗憾的是,适宜活体染色的染料较少,能显示出的结构和种类也不多。活体染色分为体内活染和体外活染两种。前者是将染料注射于生物体内,染色后再取材观察。后者是取材后,对离体的活细胞进行染色。为保持离体细胞的正常存活,染色时需供给细胞以正常的温度,渗透压,PH等。12活体染色*较为常见的活体染色剂*詹纳斯绿B(JanusgreenB)中性红台盼蓝(trypanblue)詹纳斯绿B(JanusgreenB)专一用于线粒体的染色。它可以和线粒体中的细胞色素C氧化酶结合,保持氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。必须指出的是,只有具有活性的细胞色素C氧化酶才能够把詹纳斯绿B氧化,从而使它显出颜色人口腔上皮细胞的线粒体分布*在实验过程中务必保持所取的材料的活性。通常,需要把生物材料置于0℃~4℃的冰水浴低温中,并且操作要迅速。中性红*中性红是液泡系的特殊活体染色剂,它可将不同发育时期的液泡染成不同深度的红色,在细胞处于生活状态下细胞质和核不被染色,该染料对液泡系具有一定专一性。液泡系的中性红染色点经观察*台盼蓝(trypanblue)*台盼蓝:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。实验用品*材料:黄豆根尖、洋葱、小鼠。器械:显微镜、镊子、刀片、’剪刀、解剖针、表面皿、载玻片、盖玻片、吸管、收水纸等。试剂:Ringer氏液1/3000中性红溶液1/5000詹纳斯绿B台盼蓝染色液香柏油、二甲苯、蒸馏水等实验方法*1.液泡系的中性红活体染色取黄豆芽的根尖处的纵切面↓于载玻片上的中性红染液中染色5─10min↓吸去染液,滴一滴Ringer液↓盖上盖玻片进行镜检线粒体的活体染色*用植物细胞观察线粒体的活体染色1撕取洋葱鳞茎内表皮一小块2↓3于载玻片上的1/5000JanusgreenB染色30min4↓5吸去染液,滴一滴Ringer液6↓7盖上盖玻片进行镜检8
您可能关注的文档
- 集中供热远程监控系统方案.ppt
- 项目竣工图编制.ppt
- 统计描述和推论.ppt
- 粮食库存实物检查.ppt
- 脚手架的种类脚手架工程量计算规则.ppt
- 绘本阅读活动设计.ppt
- 角的度量(度分秒的转化与计算).ppt
- 颈动脉狭窄内膜剥脱术的护理.ppt
- 转基因食品利弊.ppt
- 膝关节功能康复.pptx
- 2025届衡阳市第八中学高三一诊考试物理试卷含解析.doc
- 2025届湖南省娄底市双峰一中等五校重点中学高三第二次诊断性检测物理试卷含解析.doc
- 天水市第一中学2025届高三第二次联考物理试卷含解析.doc
- 2025届金华市重点中学高三考前热身物理试卷含解析.doc
- 2025届北京市石景山区第九中学高三第四次模拟考试物理试卷含解析.doc
- 江苏扬州市2025届高三第一次模拟考试物理试卷含解析.doc
- 2025届江苏省南通市高级中学高考物理五模试卷含解析.doc
- 广东省清远市华侨中学2025届高三第一次调研测试物理试卷含解析.doc
- 辽宁省凤城市2025届高三第五次模拟考试物理试卷含解析.doc
- 内蒙古巴彦淖尔市重点中学2025届高考仿真卷物理试卷含解析.doc
最近下载
- GB 21258-2024燃煤发电机组单位产品能源消耗限额.pdf
- 2024年上海杉达学院单招职业技能测试题库(全优).docx VIP
- 《子路、曾晳、冉有、公西华侍坐》优质课件.pptx VIP
- 一种LncRNA及其应用.pdf VIP
- (正式版)S-H-T 3231-2024 石油化工高压临氢设备用管法兰及人孔法兰.docx VIP
- 2024陇南市文县辅警考试真题及答案.docx VIP
- 腐蚀数据与选材手册-校对版.xls VIP
- 苏教版数学小学五年级下册全册课件(2024年3月修订).pptx
- 2024陇南市徽县辅警考试真题及答案.docx VIP
- 第1课《立足时代+志存高远》第1框《时代为我搭舞台》【中职专用】《心理健康与职业生涯》(高教版2023基础模块).pptx
文档评论(0)