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α-干扰素体外逆转乳腺癌细胞多药耐药的研究

116033辽宁大连市第三人民医院肿瘤一科

摘要目的：探讨干扰素（IFN-α）对人乳腺癌多耐药细胞株MX-1/T的作用

及作用机制。方法：采用甲基四氮唑盐（MTT）法检测IFN-α对多药耐药细胞

MX-1/T生长的抑制作用。结果：IFN-α浓度0～1400U/ml时对MX-1/T细胞未

见明显的抑制作用，当胞因子浓度＞1400U/ml其抑制作用明显加强，并随剂量

加大作用加强。结论：IFN-α对MX-1/T细胞的多药耐药性有明显的逆转作用，

且在一定浓度范围内有剂量依赖性。

关键词肿瘤多药耐药性逆转IFN-a

资料与方法

细胞及培养条件：人乳腺癌细胞系MX-1及其耐药细胞系MX-1/T由中科院

细胞库提供，培养于含15%胎牛血清的RPMI1640培养基（Gibco）中，37℃5%

CO【sub】2【/sub】培养箱中培养，取对数生长期细胞用于试验。

药品与试剂：IFN-α、紫杉醇。

TAX对细胞的作用：MX-1细胞和MX-1/T细胞接种于RPMI1640培养液中，

加系列浓度的紫杉醇（TAX），使TAX对MX-1及MX-1/T细胞的终浓度0～

1.0μg/ml。分别设空白组（培养液组）、对照组（未加药组）、实验组。每组均设

3个复孔，每孔100μl接种于96孔培养板，培养48小时，测定细胞活性。实验

重复5次，取其均值。

IFN-α对MX-1/T细胞的作用：取对数生长期的MX-1/T细胞于96孔培养板

中培养，加入IFN-α，使其终浓度0～5000U/ml。对照组为未加药物组，常规培

养48小时，测定细胞活性，绘制细胞因子浓度和生长曲线。实验重复5次，取

均值。

细胞耐药的逆转实验：①实验分组：对照组MX-1/T细胞，不加任何药品；

实验组Ⅱ培基含IFN（700U/ml）；实验组Ⅲ培基含IFN-α（1400U/ml）。②逆转

试验：MX-1/T细胞接种于96孔培养板，使细胞的终浓度1×10【sup】4【/sup】

细胞/ml。分为三组按上述分组给药，常规培养24小时后加入紫杉醇，使TAX

终浓度400ng/ml，再培养48小时测定细胞活性。每组均设3个复孔，实验重复

5次，取均值。③细胞毒性测定：MTT法：在培养后的细胞，继续培养4小时。

吸弃上清后，加入二甲基亚砜100μl/孔，混匀。选择于490nm的波长，在酶联

免疫检测仪测定各孔吸光度A值，计算细胞存活率。计算公式：细胞存活率（LCS）

（OD实-OD空）/（OD对-OD空）×100%，细胞抑制率1-LCS。细胞耐药倍数

耐药细胞IC50/敏感细胞IC50。实验重复5次，取其均值。通过细胞生长抑制率，

采用综合计算法，计算出IC50。

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统计分析方法：数据均采用（X±S）表示；所有数据均用SPSS13.0统计软

件处理。

结果

TAX对MX-1和MX-1/T细胞的抑制作用：本实验采用MTT法检测0～

1.0μg/ml终浓度的TAX在体外对MX-1和MX-1/T细胞的生长作用。结果显示，

随TAX浓度的增加，对细胞生长的抑制作用增加，呈现出明显的剂量依赖性关

系。

以细胞生长抑制率为纵坐标