T CPMA 32—2023 病原微生物菌（毒）种分离和鉴定方法 施万菌.pdfVIP

ICS11.020

CCSC04

团体标准

T/CPMA032—2023

病原微生物菌（毒）种分离和鉴定方法

施万菌

Isolationandidentificationofpathogenicmicroorganisms—Shewanellaspp.

2023-10–20发布2023-10-20实施

中华预防医学会发布

目次

前言II

1范围1

2规范性引用文件1

3术语和定义1

4缩略语1

5设备和材料1

6培养基和试剂1

7分离和鉴定程序2

8操作步骤3

样品类型和处理3

增菌3

分离培养3

初步鉴定3

微生物自动鉴定系统实验4

PCR确证实验4

附录A（资料性）施万菌病原学7

附录B（规范性）设备和材料8

附录C（规范性）培养基和试剂9

C.1施万菌增菌液9

C.2硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖（TCBS）琼脂9

C.3营养琼脂9

C.4三糖铁琼脂（TSI）9

C.5氧化酶试剂10

C.65×TBE电泳缓冲液10

附录D（规范性）施万菌种水平的鉴定（MLSA法）11

D.1核酸模板制备11

D.2PCR反应体系11

D.3PCR扩增条件11

D.4扩增产物分析11

D.5构建MLSA进化树11

D.6结果判定12

参考文献13

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所提出。

本文件由中华预防医学会归口。

本文件起草单位：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、马鞍山市疾病预防控制中心、中国疾

病预防控制中心、中日友好医院、北京市顺义区疾病预防控制中心。

本文件主要起草人：王多春、汪永禄、魏强、卢金星、阚飙、鲁炳怀、李颖、朱明、姜孟楠、代航、

蔡红艳、肖悦、高鹤、白雪梅。

病原微生物菌（毒）种分离和鉴定方法

施万菌

1范围

本文件规定了施万菌的分离和鉴定方法。

本文件适用于全国各级病原微生物菌（毒）种保藏机构，以及涉及人间传染的施万菌研究、教学、

检测、诊断等相关活动的机构。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

T/CPMA011病原微生物菌（毒）种保藏数据描述通则

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

施万菌属Shewanellaspp.

革兰染色阴性菌、具有单极鞭毛、兼性厌氧，主要生化特征为氧化酶、过氧化氢酶阳性，可产HS，

2

广泛分布于海洋环境和水生生物中，可造成海产品、禽畜肉制品腐败，是水生动物和人类的机会致病菌，

在人体可导致皮肤和软组织感染、菌血症、肝胆疾病、中耳炎和其他感染。

注：详细资料参见附录A。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp：碱基对（Basepair）

MLSA：多位点序列分析（Multilocu