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Src蛋白在肝癌HepG2细胞增殖凋亡中作用的初步研究--第1页

Src蛋白在肝癌HepG2细胞增殖凋亡中作用的初步研究

毛成毅;郑继军;杜娟;马瑜;林俐;李增鹏;陈芳

【摘要】目的研究Src蛋白在人肝癌细胞株HepG2细胞增殖凋亡过程中的作用.

方法应用Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂PP2不同浓度处理HepG2细胞前后,使用免

疫组化、流式细胞术、MTT法检测Src蛋白的表达以及HepG2细胞增殖和凋亡

情况.结果Src蛋白在HepG2细胞中高表达,用不同浓度PP2处理HepG2细胞后,

能够显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖,增加凋亡.结论Src蛋白在人肝癌细胞株

HepG2细胞的增殖凋亡过程中起着重要作用.

【期刊名称】《重庆医学》

【年(卷),期】2010(039)001

【总页数】3页(P19-20,23)

【关键词】肝癌;Src蛋白;细胞增殖

【作者】毛成毅;郑继军;杜娟;马瑜;林俐;李增鹏;陈芳

【作者单位】第三军医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军

医大学大坪医院野战外科研究所,肿瘤中心,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野

战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,

重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军

医大学大坪医院野战外科研究所,病理科,重庆,400042;第三军医大学大坪医院野战

外科研究所,病理科,重庆,400042

【正文语种】中文

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【中图分类】R735.7

原癌基因Src在调节正常细胞的生长、发育、增殖和凋亡等方面发挥着重要作用,

其异常表达和肿瘤的发生、发展密切相关。在人类许多肿瘤中(如结肠癌、乳腺癌

和胰腺癌)都存在Src蛋白的过度表达和活化。肝癌细胞的浸润、转移是临床上治

疗肝癌失败的重要因素。近年来国内外研究表明,许多肝癌组织中存在高度活化的

Src蛋白,然而其在肝癌中的作用还未完全阐明[1-3]。本文中应用免疫组化、流式

细胞术以及MTT法检测Src蛋白在HepG2细胞中的表达以及细胞增殖和凋亡情

况,同时用特异性Src蛋白酪氨酸激酶抑制剂PP2作用于肝癌细胞株HepG2细胞,

研究Src蛋白对肝癌细胞增殖凋亡的影响。

1材料与方法

1.1材料(1)人肝癌细胞株HepG2细胞由第三军医大学西南医院感染科惠

赠;(2)DMEM培养基,小牛血清,胰蛋白酶,PBS;(3)兔抗人单克隆抗体Src(Cell

Signaling公司);(4)PP2(Calbiochem公司);(5)羊抗兔辣根过氧化物酶标记的二抗

(北京中杉公司);(6)SP免疫组化试剂盒(北京中山公司);(7)MTT,DMSO(Sigma公

司);(8)倒置显微镜(Olympuls公司);(9)6、96孔细胞培养板,细胞培养瓶(Corning

公司);(10)CO2细胞培养箱(Thermo公司);(11)AnnexinV/FITC及PI试剂盒(北京

晶美生物有限公司);(12)DMN-9602酶标分析仪(北京普朗新技术有限公司)。

1.2免疫组化染色取对数生长期人肝癌细胞株HepG2细胞,以0.25%胰酶消