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GB4789.2—2022

食品安全国家标准

食品微生物学检验菌落总数测定

1范围

本标准规定了食品中菌落总数(Aerobicplatecount)的测定方法。

本标准适用于食品中菌落总数的测定。2术语和定义

2.1

菌落总数aerobicplatecount

食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g(mL)检样

中形成的微生物菌落总数。3设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：a)恒温培养箱：36℃±1℃,30℃±1℃。

b)冰箱：2℃~5℃。

c)恒温装置：48℃±2℃。

d)天平：感量为0.1g。

e)均质器。f)振荡器。

g)无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

h)无菌锥形瓶：容量250mL、500mL。i)无菌培养皿：直径90mm。

j)pH计或pH比色管或精密pH试纸。

k)放大镜或／和菌落计数器。

4培养基和试剂

4.1平板计数琼脂培养基：见A.1。

4.2菌落总数测试片：应符合GB4789.28中平板计数琼脂培养基质量控制要求，且主要营养成分与平板计数琼脂培养基配方一致。

4.3无菌磷酸盐缓冲液：见A.2。4.4无菌生理盐水：见A.3。

5检验程序

菌落总数的检验程序见图1。

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GB4789.2—2022

图1菌落总数的检验程序

6操作步骤

6.1样品的稀释

6.1.1固体和半固体样品：称取25g样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min~10000r/min均质1min~2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1∶10的样品匀液。

6.1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品置于盛有225mL无菌磷酸盐缓冲液或无菌生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内可预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min~2min,制成1∶10的样品匀液。当结果要求为每g样品中菌落总数

时，按6.1.1操作。

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GB4789.2—2022

6.1.3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1∶10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1∶100的样品

匀液。

6.1.4按6.1.3操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管或

吸头。

6.1.5根据对样品污染状况的估计，选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取1mL样品匀液于无菌培养皿内，每个稀释度做两个培养皿。同时，分别吸取1mL空白稀释液加入

两个无菌培养皿内作空白对照。

6.1.6及时将15mL~20mL冷却至46℃~50℃的平板计数琼脂培养基（可放置于48℃±2℃恒温

装置中保温）倾注培养皿，并转动培养皿使其混合均匀。6.2培养

6.2.1水平放置待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48h±2h。水产品30℃±1℃培养72h±3h。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面蔓延生长的菌落，可在凝固后的琼脂培养基表面覆盖一薄层平板计数琼脂培养基（约4mL),凝固后翻转平板，进行培养。

6.2.2如使用菌落总数测试片，应按照测试片所提供的相关技术规程操作。6.3菌落计数

6.3.1可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以

菌落形成单位(colonyformingunit,CFU)表示。

6.3.2选取菌落数在30CFU~300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU

的平板记录具体菌落数，大