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红藻多糖含量的测定
B.1原理
红藻多糖在酸性条件下水解，水解物在硫酸的作用下，迅速脱水生成糖醛衍生物，并与苯酚反应生
成橙黄色溶液，反应产物在490nm处比色测定，标准曲线法定量。
B.2试剂
除另有说明外，所用试剂均为分析纯。
B.2.1水为GB/T6682中规定的三级水。
B.2.2浓硫酸
B.2.3苯酚
B.2.4半乳糖
B.2.550g/L苯酚溶液：称取5g苯酚，用水溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，摇匀，置4℃冰箱中避光
贮存。
B.2.6200μg/mL半乳糖标准储备溶液：称取半乳糖0.02g（精确至0.0001g），用水溶解并定容至100mL
容量瓶中，摇匀，置4℃冰箱中避光贮存。
B.3仪器
B.3.1分光光度计。
B.3.2分析天平：感量0.0001g。
B.3.3涡旋混合器。
B.3.4棕色比色管：25mL。
B.3.5移液管：1mL、5mL。
B.3.6容量瓶：100mL。
B.4测定步骤
B.4.1标准曲线的制定
将半乳糖标准储备溶液逐级稀释，配制成浓度为0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、
200μg/mL的半乳糖标准溶液。分别移取上述溶液1mL于25mL比色管中，加入50g/L苯酚溶液1.0mL，
然后立即加入浓硫酸5.0mL（与液面垂直加入，勿接触试管壁，以便反应液充分混合），静置10min，
涡旋混匀，室温下静置20min，在490nm波长处测定吸光度。以半乳糖质量浓度为横坐标，吸光度为
纵坐标，制定标准曲线。
B.4.2测定
称取红藻多糖样品0.01g（精确至0.0001g），用水溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀。吸取
样品溶液1.0mL按B4.1步骤操作，测定吸光度。
B.4.3结果计算
样品中多糖含量按式计算，计算结果保留三位有效数字；
××10−6
X=×100
式中：
X—样品中多糖的含量，单位为百分率（%）；
m—从标准曲线上查得样品溶液中的含糖量，单位为微克每毫升（μg/mL）；
1
V—样品定容的体积，单位为毫升（mL）；
m—样品的质量，单位为克（g）。
B.5重复性
两个平行测定结果的相对偏差不得超过10%，否则重新测定。
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