2.2通过体细胞杂交可获得新的植物体（教学课件）-高中生物学浙科版（2019）选择性必修三（共29张PPT).pptxVIP

第二章植物细胞工程第二节通过体细胞杂交可获得新的植物体

素养目标生命观念基于植物体细胞杂交的定义，利用结构与功能观、生命的物质观和能量观，理解植物体细胞杂交技术的原理。科学思维根据植物组织培养和植物体细胞杂交的技术流程，利用比较与分析、归纳与概括的方法，理解两者之间的区别和联系。科学探究根据科学史，掌握植物体细胞杂交技术发现的过程，并能分析过程中使用的相关试剂及作用。社会责任根据科学史，掌握植物体细胞杂交技术发现的过程，并能分析过程中使用的相关试剂及作用。

教学重难点植物体细胞杂交的过程和应用价值。01植物体细胞杂交的过程。02

课程导入用传统的有性杂交方法能得到这种后代吗？

课程导入番茄细胞马铃薯细胞＋→杂种细胞

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础植物体细胞杂交技术将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。原理细胞膜的流动性、植物细胞的全能性可遗传变异类型染色体数目变异育种类型细胞工程育种

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础原生质体利用酶解法去除植物细胞壁后的细胞结构，包括细胞膜、细胞质和细胞核，球形。番茄细胞马铃薯细胞番茄原生质体马铃薯原生质体去除细胞壁纤维素酶和果胶酶显微镜下的球形原生质体

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础原生质体与原生质层原生质体细胞壁细胞膜细胞质液泡细胞核原生质层细胞壁细胞膜细胞质液泡膜细胞液原生质层不包括细胞液和细胞核。原生质体：指的是脱去细胞壁的细胞。动物细胞也可看做是原生质体原生质层：成熟植物细胞的细胞膜、液泡膜和介于这两层膜之间的细胞质

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础原生质体的优点没有了坚硬致密的细胞壁的阻碍，植物细胞之间的融合得以实现01原生质体也更容易被导入外源基因，是植物基因工程的理想受体02与完整细胞一样具有全能性，仍可产生细胞壁，经诱导分化成完整植株03

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础原生质体的获取、培养0.5~0.6mol/L的甘露醇（或一定浓度的蔗糖）（较高渗透压）纤维素酶、果胶酶目的使细胞处于微弱的质壁分离状态，这样有利于完整的原生质体的释放，防止原生质体被破坏。球形的原生质体植物细胞材料选择：分裂旺盛，再分化能力强的（植物的年龄、生长发育状态等），如根尖、愈伤组织或悬浮培养细胞等。可用无菌的G6玻璃砂漏斗过滤灭菌。纯化方法：沉降法（低速离心法）原生质体活力检测：荧光标记法、染色法、形态观察法、胞质环流法、氧摄入量评价法

成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础原生质体活力检测活的原生质体在光照下光合放氧，无光呼吸耗氧。氧电极法测呼吸速率活原生质体会随着外界渗透压的变化体积变化。如放入高渗溶液，细胞皱缩。渗透压变化法是否存在胞质环流判断原生质体活力胞质环流法FDA法：FDA（二乙酸荧光素）能穿越细胞质膜，被活细胞内的酯酶裂解，在荧光显微镜下发荧光（荧光素）。伊凡蓝法：伊凡蓝不能穿过质膜，但质膜受到严重损坏使细胞被染色。染色成功培养原生质体是植物体细胞杂交技术的基础植物原生质体培养的应用02利用原生质体进行外源基因的转化01利用原生质体融合获得融合细胞03利用原生质体再生植株04利用固定化原生质体培养生产次生代谢产物

由杂种细胞培育出的新植物体可能会具有新的特性科研实践的一些成果1960年英国植物生理学家科金用酶解法去除植物细胞壁，分离出了植物原生质体。1971年科研人员首次由原生质体获得了烟草再生植株。据不完全统计，至少有400多种植物的原生质体经培养后成功再生植株。我国科研人员获得50多种植物的原生质体再生植株。意义：原生质体培养成功标志着植物细胞工程技术又向前迈进了一步，为植物细胞工程和基因工程的研究提供了先进的实验体系，具有重要的理论研究和实际应用价值。

由杂种细胞培育出的新植物体可能会具有新的特性原生质体的融合番茄原生质体马铃薯原生质体正在融合的原生质体细胞膜的流动性原理电刺激、离心、振荡物理手段聚乙二醇（PEG）化学手段020103

由杂种细胞培育出的新植物体可能会具有新的特性正在融合的原生质体杂种细胞再生出细胞壁诱导成功的标志融合的原生质体经培养后再生出新的细胞壁影响原生质体再生壁的因素植物基因型、供体细胞的分化程度、培养基成分、渗透压、有些植物加聚乙二醇有利于细胞壁发育注意再生出细胞壁是其能进行有丝分裂的前提，且再生细胞壁之后，应逐步降低渗透压。

由杂种细胞培育出的新植物体可能会