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四、实验步骤
1.按照日立F-2500型荧光分光光度计的使用方法开好仪器。2.配制系列标准溶液:取5个50mL容量瓶,分别加入1.00,2.00,3.00,4.00,5.00mL浓度为10.0μg/mL的标准溶液,用水稀释至刻度,摇匀。第30页,共61页,星期六,2024年,5月3.标准曲线的绘制把各标准样品置于试样架内,设置好仪器的工作条件,用蒸馏水做空白,分别扫描空白和标样的荧光光谱,根据峰高和浓度绘制标准曲线。4.未知试样的测定准确称出一定量的未知试样于小烧杯中,用水溶解并定容至100mL容量瓶内,摇匀,用测定标准曲线相同的条件,测其荧光强度。第31页,共61页,星期六,2024年,5月五、数据处理与分析根据试液的荧光强度,从标准曲线上查出试液中维生素B2的浓度,按下列公式计算维生素B2的含量。维生素B2的含量=C×100/G(μg/g)C—试液中维生素B2的浓度(从标准曲线上查出,单位是μg/mL)C—未知试样的重量,单位是克(g)100—试样被稀释的体积。第32页,共61页,星期六,2024年,5月实验七
紫外吸收光谱法测定苯甲酸一、实验目的了解紫外吸收光谱仪的基本构造与一般使用方法;2.能用于测定样品中苯甲酸的含量。第33页,共61页,星期六,2024年,5月二、实验原理
苯甲酸在225nm处有最大吸收峰,其吸光度与浓度的关系服从朗伯-比尔定律。第34页,共61页,星期六,2024年,5月三、仪器与试剂
仪器:UV1600紫外分光光度计;10mL容量瓶7个;20mL、5mL吸量管各1支。2.试剂:0.1mol?L-1NaOH溶液;苯甲酸钠(AR);蒸馏水。第35页,共61页,星期六,2024年,5月四、实验步骤
1.苯甲酸钠贮备液的配制:称量经过干燥的苯甲酸钠适量于1000mL容量瓶中,用水溶解,并定容。2.苯甲酸钠工作溶液的配制:取20.00mL贮备液稀释定容至1000mL。3.苯甲酸钠系列标准溶液的配制:分别取苯甲酸钠工作溶液0-5.00mL按下表配制。第36页,共61页,星期六,2024年,5月容量瓶编号12345678工作液(mL)01.002.003.004.005.004.004.00加入NaOH(mL)1.001.001.001.001.001.001.001.00定容(mL)10.010.010.010.010.010.010.010.0C(ppm)02.04.06.08.010.0X1X2第37页,共61页,星期六,2024年,5月五、数据处理与分析1.标准曲线的绘制:以苯甲酸钠系列标准溶液的吸光度为纵坐标,相应的浓度为横坐标,绘制作A-C标准曲线。2.样品溶液中苯甲酸钠含量计算:从A-C标准曲线上查出X值,从而求出样品中苯甲酸的含量。第38页,共61页,星期六,2024年,5月实验八
双波长法同时测定维生素C和E一、实验目的进一步熟悉紫外吸收光谱仪的基本构造,掌握其一般使用方法;2.能用双波长法同时测定双组分的含量。第39页,共61页,星期六,2024年,5月二、实验原理
吸光度具有加合性,根据两组分吸收曲线的性质,选择两个合适的测定波长,通过解联立方程的可以同时测出样品中双组分的含量。第40页,共61页,星期六,2024年,5月三、仪器与试剂
仪器:UV1600紫外分光光度计;50mL容量瓶10个;20mL、5mL吸量管各2支。2.试剂:维生素C;维生素E;无水乙醇。第41页,共61页,星期六,2024年,5月四、实验步骤
1.维生素C和维生素E标准溶液的配制;2.维生素C和维生素E紫外吸收曲线的绘制,确定测定波长;3.维生素C和维生素E标准曲线的绘制;4.未知试样的测定。第42页,共61页,星期六,2024年,5月五、数据处理与分析1.维生素C吸收曲线的绘制;2.维生素E吸收曲线的绘制;3.根据吸收曲线测定波长的选定;4.维生素C标准曲线的绘制:5.维生素E标准曲线的绘制:
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