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ICS67.050
B23DB12
天津市地方标准
DB12/T651—2016
转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2及其衍生品种
定量检测实时荧光PCR方法
Detectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedproducts—
QuanlitativePCRmethodforherbicide-resistantsoybeanGTS40-3-2anditsderivates
2016-09-27发布2016-11-01实施
天津市市场和质量监督管理委员会发布
DB12/T651—2016
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由天津市农村工作委员会提出。
本标准起草单位:天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天
津市质量技术监督宝坻检测中心。
本标准主要起草人:兰青阔、宛煜嵩、杨炳存、赵新、李亮、陈锐、朱珠、刘娜、王成、徐石勇。
本标准2016年9月首次发布。
I
DB12/T651—2016
转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2及其衍生品种定量检测
实时荧光PCR方法
1范围
本标准规定了转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2转化体特异性定量PCR检测方法的术语和定义、
检测方法、结果计算。
本标准适用于转基因耐除草剂大豆GTS40-3-2及其衍生品种,以及制品中GTS40-3-2转化体的
定量PCR检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求
农业部1485号公告—4—2010转基因植物及其产品成分检测DNA提取和纯化
农业部2031号公告—19—2013转基因植物及其产品检测抽样
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
Lectin基因Lectingene
编码大豆凝集素的基因。
3.2
GTS40-3-2转化体特异性序列event-specificsequenceofGTS40-3-2
GTS40-3-2外源插入片段5′端与大豆基因组的连接区序列,包括35S启动子部分序列和大豆基因
组的部分序列。
4原理
根据大豆外源基因和内标基因特异性序列设计引物和TaqMan荧光探针,对标准样品和试样同时
进行实时荧光PCR扩增。根据标准样品模板拷贝数与Ct值间的线性关系,分别绘制外源基因和内标
基因的标准曲线。计算试样中外源基因和内标基因的拷贝数及其比值。
5检测方法
5.1试剂和材料
除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水或符合GB/T6682规定的一级水。
5.1.1TaqMan荧光PCR反应试剂盒。
1
DB12/T651—2016
5.1.2
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