DB22T 1613-2012 饲料中三聚氰胺含量的测定液相色谱-质谱质谱法.docxVIP

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备案号：35744-2013DB22

吉林省地方标准

DB22/T1613—2012

饲料中三聚氰胺含量的测定液相色谱-质谱/质谱法

Determinationofmelamineresiduesinfeeds——HPLC-MS/MSmethod

2012-12-01发布2013-01-01实施

吉林省质量技术监督局发布

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DB22/T1613—2012

前言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心、大成集团、嘉吉生化玉米工业有限公司、白城出入境检验检疫局、珲春出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：胡婷婷、姚天玲、王晓红、张丽、冯博、刘伟艳、张琦、李玲。

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DB22/T1613—2012

饲料中三聚氰胺含量的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了饲料中三聚氰胺的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于饲料及饲料原料中三聚氰胺的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

试样中残留的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1三氯乙酸（C2HCl3O2）：优级纯。

4.2乙酸铵（CH3COONH4）：优级纯。

4.3乙酸铅（C4H6O4Pb.H2O）。

4.4甲醇（CH3OH）：色谱纯。

4.5乙腈（CH3CN）：色谱纯。

4.6氨水（NH4OH）。

4.7甲酸（CH2O2）：优级纯。

4.81%三氯乙酸溶液：准确称取10g三氯乙酸（4.1）于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。

4.930%乙酸铅溶液：称取60g乙酸铅（4.3），用140mL水溶解，混匀。

4.105%氨化甲醇溶液：准确量取5mL氨水（4.6）和95mL甲醇，混匀后备用。

4.110.1%甲酸的水溶液：准确吸取1mL甲酸（4.7），用水定容至1L，混合后备用。

4.1210mmol/L乙酸铵溶液：准确称取0.772g乙酸铵（4.2），用水溶解并定容至1L，混匀后备用。

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DB22/T1613—2012

4.13标准储备溶液：准确称取三聚氰胺标准物质（CAS号：108-78-1，含量≥99.0%）100mg（精确到0.1mg），用甲醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中，配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液。0℃~4℃可避光保存6个月。

4.14标准工作液：准确移取一定体积的标准储备溶液（4.13），根据需要用基质液稀释成三聚氰胺浓度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL和50.0μg/mL的系列标准工作液。该溶液须配制于棕色容量瓶中，4-6℃条件下保存。

4.15混合型阳离子交换固相萃取柱（MCX固相萃取柱）：60mg/3mL。使用前依次用3mL甲醇、3mL水活化。

4.16滤膜：0.22μm，有机系。

5仪器

5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。

5.2组织捣碎机。

5.3高速离心机：10000r/min。

5.4氮吹仪。

5.5分析天平：感量为0.01g和0.0001g。

5.6超声波清洗器：40kHz。

5.7涡旋混合器。

6分析步骤

6.1提取

称取5g（精确到0.01g）粉碎后的试样置于50mL离心管中，加人25mL三氯乙酸溶液（4.8），200μL乙酸铅溶液（4.9），涡旋混合1min，超声提取10min后，10000r/min离心5min，取上