中药材中黄曲霉毒素的测定 液相色谱串联质谱法（征求意见稿）.docx

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中药材中黄曲霉毒素的测定液相色谱串联质谱法

1范围

本标准规定了中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2（以下简称AFTB1、AFTB2、AFTG1和AFTG2）的测定方法。

本标准适用于柏子仁、决明子、陈皮、莲子、薏苡仁、地龙、螟蚣、马钱子、蝉蜕、松香、当归等动植物类中药材及饮片中AFTB1、AFTB2、AFTG1和AFTG2的高效液相色谱-串联质谱法测定。

2规范性引用文件

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GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3原理

用甲醇-水溶液提取试样中的AFTB1、AFTB2、AFTG1和AFTG2，固相净化柱法或免疫磁珠法净化，净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离，高效液相色谱-串联质谱检测，同位素内标法定量。

4试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1乙腈（CH3CN）：色谱纯；

4.1.2甲醇（CH3OH）：色谱纯；

4.1.3乙酸铵（CH3COONH4）：色谱纯；

4.1.4氯化钠（NaCl）；

4.1.5磷酸氢二钠（Na2HPO4）；

4.1.6磷酸二氢钾（KH2PO4）；

4.1.7氯化钾（KCl）；

4.1.8盐酸（HCl）。

4.2试剂配制

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4.2.1磷酸盐缓冲溶液（PBS溶液）：称取8.0g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾，加水900ml使溶解，用盐酸调节pH值至7.0±0.1，加水稀释至1000ml，混匀。

4.2.2乙酸铵溶液（5mmol/L）：称取0.39g乙酸铵，用水溶解后加水稀释至1000ml，混匀。

4.2.3乙腈+甲醇溶液（50：50）：取500ml乙腈加入500ml甲醇，混匀。

4.3标准物质

4.3.1AFTB1标准品（C17H12O6，CAS：1162-65-8）：纯度≥98%，浓度为25μg/ml，或其他经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

4.3.2AFTB2标准品（C17H14O6，CAS：7220-81-7）：纯度≥98%，浓度为25μg/ml，或其他经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

4.3.3AFTG1标准品（C17H12O7，CAS：1165-39-5）：纯度≥98%，浓度为25μg/ml，或其他经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

4.3.4AFTG2标准品（C17H14O7，CAS：7241-98-7）：纯度≥98%，浓度为25μg/ml，或其他经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

4.3.5同位素内标混合标准溶液13C17-AFTB1（C17H12O6，CAS：157449-45-0）、13C17-AFTB2（C17H14O6，CAS：157470-98-9）、13C17-AFTG1（C17H12O7，CAS：157444-07-9）和13C17-AFTG2（C17H14O7，CAS：157462-49-7）：纯度≥98%，浓度为0.5μg/ml。

4.4标准溶液的配制

4.4.1混合标准工作液（2.5μg/ml）：分别移取25μg/mlAFTB1（4.3.1）、AFTB2（4.3.2）、AFTG1（4.3.3）和AFTG2（4.3.4）各1ml至10ml容量瓶中，用甲醇定容。此溶液浓度约为2.5μg/ml。该溶

液在-20℃下避光保存。有效期3个月。

4.4.2混合标准工作液（100ng/ml）：准确移取混合标准工作液（4.4.1）400μl至10ml容量瓶中，用甲醇定容。此溶液浓度为100ng/ml。该溶液在-20℃下避光保存。有效期1个月。

4.4.3混合同位素内标工作液（50ng/ml）：准确移取同位素内标混合标准溶液（4.3.5）1ml至10ml容量瓶中，用甲醇定容至10ml。在-20℃下避光保存。有效期1个月。

4.4.4标准系列工作溶液：准确移取混合标准工作液（4.4.2）20μl、50μl、100μl、200μl、500μl、1000