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基于QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定纸制品中4种异噻唑啉酮类杀菌剂

一、1.样品前处理方法

(1)样品前处理是QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定纸制品中异噻唑啉酮类杀菌剂的关键步骤之一。针对纸制品样品，首先需将样品剪碎或研磨成粉末状，以确保样品的均一性。对于不同类型和厚度的纸制品，样品的预处理方法可能有所不同。例如，对于较厚的纸制品，可能需要采用多次剪裁或研磨以降低样品厚度，提高提取效率。在实际操作中，通常将样品与适量的QuEChERS试剂（如无水硫酸镁、碳酸钠、乙腈等）混合，充分振荡混匀，使样品中的目标化合物充分溶解并转移到溶剂中。

(2)在样品前处理过程中，提取效率是一个重要的考量因素。为了提高提取效率，可以采用多种提取方法，如加速溶剂萃取（ASE）、超声波辅助提取（UAE）等。以ASE为例，其基本原理是利用高压泵将溶剂快速注入样品中，通过增加溶剂与样品的接触面积和时间，加速目标化合物的溶解和提取。实验结果表明，ASE方法在提取异噻唑啉酮类杀菌剂时，提取效率可达到90%以上。此外，为了确保提取过程中的准确性和重现性，建议在实验过程中严格控制提取时间、温度和溶剂用量等参数。

(3)提取后的样品溶液需要进行净化处理，以去除干扰物质，提高检测的灵敏度和准确性。常用的净化方法包括固相萃取（SPE）、液-液萃取（LLE）等。以SPE为例，其基本原理是利用固定相吸附目标化合物，通过洗脱液将目标化合物从固定相上洗脱下来，达到净化目的。在实际操作中，通常选用C18或C8等极性固定相进行SPE，以适应不同极性的异噻唑啉酮类杀菌剂。经过净化处理的样品溶液，其干扰物质含量显著降低，有利于后续的液相色谱-串联质谱检测。例如，在一项针对纸制品中异噻唑啉酮类杀菌剂的检测研究中，通过SPE净化处理后，样品溶液的干扰物质含量降低了5倍以上，提高了检测的准确性和可靠性。

二、2.仪器与试剂

(1)在进行QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定纸制品中4种异噻唑啉酮类杀菌剂时，所使用的仪器包括高效液相色谱仪（HPLC）配备电喷雾离子源（ESI）的串联质谱仪（MS/MS）。HPLC用于分离样品中的目标化合物，而MS/MS则用于检测和定量这些化合物。仪器应具备高灵敏度和高分辨率，以实现对低浓度目标化合物的准确检测。此外，还需要配备自动进样器、柱温箱和在线脱气系统等辅助设备，以确保实验的顺利进行。

(2)实验中所需的试剂包括乙腈、丙酮、无水硫酸镁、碳酸钠、磷酸二氢钠、盐酸等。乙腈和丙酮作为溶剂，用于样品的提取和净化；无水硫酸镁和碳酸钠是QuEChERS试剂的组成部分，用于去除样品中的脂肪和杂质；磷酸二氢钠和盐酸则用于调节溶液的pH值，以优化液相色谱和质谱的分离效果。所有试剂均需使用分析纯级别，以保证实验结果的准确性和可靠性。

(3)在实验过程中，还可能需要一些特殊的试剂和耗材，如SPE小柱、滤膜、进样针、样品瓶等。SPE小柱用于样品的净化处理，滤膜用于过滤样品溶液中的杂质，进样针用于将样品溶液注入HPLC系统，样品瓶则用于存储和处理样品。这些试剂和耗材的质量直接影响到实验结果的准确性和重现性，因此应选择正规厂家生产的产品，并严格按照产品说明书进行操作。

三、3.检测方法与条件

(1)检测过程中，液相色谱的流动相系统通常由乙腈和0.1%甲酸水溶液组成，以实现良好的分离效果。流动相的pH值控制在2.5左右，有助于提高异噻唑啉酮类杀菌剂的响应。色谱柱选择C18柱，柱温设置为30°C，以减少溶剂蒸发和柱效下降。进样体积通常为10微升，流速控制在1.0毫升/分钟。为了提高检测灵敏度，可在流动相中加入一定比例的有机溶剂，如乙腈或异丙醇，以降低目标化合物的检测限。

(2)串联质谱的检测模式通常采用多反应监测（MRM）模式，选择具有高响应和低干扰的离子对进行定量分析。对于4种异噻唑啉酮类杀菌剂，分别选择其分子离子和特定的碎片离子作为定量和定性依据。离子源温度设置为200°C，扫描范围为50-500Daltons，碰撞能量设置为15eV。为了提高检测灵敏度和选择性，可在MS检测前进行离子源清洗，以去除可能存在的杂质和残留物。

(3)定量分析中，采用内标法定量，内标物选择与目标化合物结构相似且在样品中含量稳定的物质。内标物的添加量通常为样品总量的1%-5%，以减少实验误差。标准曲线的制备采用一系列已知浓度的标准溶液，在相同条件下进行HPLC-MS/MS检测，绘制标准曲线并计算相关系数。定量分析时，根据标准曲线计算样品中目标化合物的含量。同时，设置适当的方法验证参数，如回收率、精密度、线性范围和检测限等，以确保检测方法的准确性和可靠性。

四、4.结果与分析

(1)通过QuEChERS-液相色谱-串联质谱法对纸制品中4种异