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油橄榄叶提取物对铅中毒小鼠心肌乳酸脱氢酶活性和抗氧化能力的影响

一、研究背景与目的

(1)随着工业化和城市化的快速发展，重金属污染问题日益严重，其中铅作为一种常见的重金属污染物，对环境和人体健康造成了极大的危害。铅中毒可导致多种器官和系统的损伤，尤其是对心血管系统的损害尤为显著。心肌乳酸脱氢酶（LDH）是心肌细胞损伤的重要标志物，其活性变化可以反映心肌细胞的损伤程度。因此，研究铅中毒对心肌的影响以及寻找有效的干预措施具有重要意义。

(2)油橄榄叶提取物（OliveLeafExtract，OLE）是一种天然植物提取物，具有广泛的生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗菌等。研究表明，OLE能够通过清除自由基、抑制氧化应激反应等途径保护细胞免受损伤。近年来，OLE在防治重金属中毒方面的研究逐渐增多，但关于OLE对铅中毒小鼠心肌损伤保护作用的研究尚不充分。本研究旨在探讨OLE对铅中毒小鼠心肌乳酸脱氢酶活性和抗氧化能力的影响，为临床应用OLE防治铅中毒提供理论依据。

(3)本研究采用铅中毒小鼠模型，通过观察LDH活性变化、检测心肌组织中抗氧化酶活性以及分析心肌组织形态学变化，评估OLE对铅中毒小鼠心肌的保护作用。通过比较不同剂量OLE干预组与铅中毒组之间的差异，分析OLE对心肌损伤的保护机制，为开发新型天然药物提供实验依据。此外，本研究还将探讨OLE的最佳给药剂量，为临床治疗铅中毒提供参考。

二、材料与方法

(1)实验动物选用SPF级雄性昆明小鼠，体重（20±2）g，由某生物医学实验动物中心提供。实验前，动物适应环境1周，期间保持室温（22±2）℃、相对湿度（55±5%）和12小时光照/12小时黑暗周期。铅中毒模型制备：将小鼠随机分为对照组、铅中毒组、OLE低剂量组、OLE中剂量组和OLE高剂量组，每组10只。对照组给予生理盐水灌胃，其余各组给予含铅200mg/L的生理盐水灌胃，连续7天。OLE组给予相应剂量的OLE溶液灌胃，每天1次，连续7天。

(2)心肌乳酸脱氢酶（LDH）活性测定：采用全自动生化分析仪，采用连续监测法检测心肌组织中的LDH活性。具体操作如下：取小鼠心脏组织约0.1g，加入适量的磷酸盐缓冲液（pH=7.4）制成10%的组织匀浆，在4℃、12,000g离心10分钟，取上清液，按照试剂盒说明书进行LDH活性测定。

(3)心肌组织中抗氧化酶活性检测：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测心肌组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。具体操作如下：取小鼠心脏组织约0.1g，加入适量的磷酸盐缓冲液（pH=7.4）制成10%的组织匀浆，在4℃、12,000g离心10分钟，取上清液，按照试剂盒说明书进行SOD、GSH-Px和CAT活性检测。同时，采用TBA法检测心肌组织中丙二醛（MDA）含量，以评估氧化应激程度。实验数据采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，采用单因素方差分析（ANOVA）和LSD多重比较法进行差异显著性检验，P0.05表示差异具有统计学意义。

三、结果与分析

(1)本研究结果显示，与对照组相比，铅中毒组小鼠的心肌乳酸脱氢酶（LDH）活性显著升高（P0.05），表明铅中毒对心肌细胞造成了损伤。进一步分析显示，随着OLE剂量的增加，铅中毒组小鼠的LDH活性逐渐降低，其中OLE高剂量组与铅中毒组相比，LDH活性降低最为显著（P0.01）。这表明OLE能够有效降低铅中毒小鼠心肌细胞损伤，具有一定的保护作用。

(2)在抗氧化能力方面，本研究结果显示，铅中毒组小鼠的心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性均显著低于对照组（P0.05），表明铅中毒导致小鼠心肌组织抗氧化能力下降。同时，铅中毒组小鼠心肌组织中丙二醛（MDA）含量显著升高（P0.05），进一步证实了铅中毒引起的氧化应激。而在OLE干预组中，随着OLE剂量的增加，铅中毒小鼠心肌组织中SOD、GSH-Px和CAT活性逐渐升高，MDA含量逐渐降低，其中OLE高剂量组与铅中毒组相比，这些指标均有显著差异（P0.01）。这表明OLE能够有效提高铅中毒小鼠心肌组织的抗氧化能力，减轻氧化应激损伤。

(3)在心肌组织形态学方面，HE染色结果显示，铅中毒组小鼠心肌细胞出现明显的肿胀、空泡化、细胞核固缩等形态学改变，提示心肌细胞损伤严重。而在OLE干预组中，随着OLE剂量的增加，心肌细胞肿胀、空泡化等形态学改变逐渐减轻，细胞核固缩现象也有所改善。其中，OLE高剂量组与铅中毒组相比，心肌细胞形态学改变最为明显改善（P0.01）。这些结果进一步证实了OLE对铅中毒小鼠心肌的保护作用，提示OLE可能通过改善心肌细胞形态学改变，减轻心肌损伤。