2024_2025学年高中生物第一章无菌操作技术实践第一节微生物的分离和培养第2课时微生物分离和培养.docVIP

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第2课时微生物分别和培育的技术操作（以大肠杆菌为例）

[随堂检测][学生用书P13]

学问点一培育基的配制

1．在培育基的配制过程中，具有如下步骤，其正确依次为()

①熔化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装

⑥称量

A．①②⑥⑤③④

B．⑥①②⑤③④

C．⑥①②⑤④③

D．①②⑤④⑥③

解析：选B。上述步骤中，培育基的配制依次为称量→熔化→调pH→分装→加棉塞→包扎。

2．牛肉膏蛋白胨培育基中加入琼脂这一志向的凝固剂，下列关于琼脂的说法，不正确的是()

A．不被所培育的微生物分解利用，对所培育的微生物无毒害作用

B．在微生物生长温度范围内保持固体状态

C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长

D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透亮度好，凝固力强

解析：选C。在液体培育基中加入凝固剂如琼脂后，制成固体培育基，它是试验室中最常用的培育基之一。固体培育基中可形成肉眼可见的单个细胞繁殖而来的子细胞群体，即菌落，用于微生物的分别、计数和菌种鉴定等。琼脂作为一种志向的凝固剂，是其性质确定琼脂不会被微生物利用且对微生物无毒害作用，在灭菌过程中不会被破坏，透亮度好，凝固力强。琼脂在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。

学问点二无菌操作和接种技术

3．做“微生物的分别与培育”试验时，下列叙述正确的是()

A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培育基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培育皿中菌落时，应标记在皿底上

解析：选D。A项，在高压灭菌的操作过程中，加热结束后应让灭菌锅内温度自然下降，待压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子。B项，倒平板时，用左手将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，而不是完全取下放到一边。C项，接种环经火焰灼烧灭菌后应在火焰旁冷却后再挑取菌落。D项，在微生物的培育中，一般将培育皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。

4．下图为试验室培育和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是()

A．①②③步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行

B．步骤①中待倒入的培育基冷却后盖上培育皿的皿盖

C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灭菌处理

D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培育箱中培育

解析：选B。由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培育。①②③步骤操作时须要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A正确；倒完平板后马上盖上培育皿，冷却后将平板倒过来放置，B错误；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种干脆来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目渐渐削减，以便得到菌落，C正确；划线接种结束后，将平板倒置后放入培育箱中培育，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培育基造成污染，D正确。

5．如图是微生物平板划线示意图。划线的依次为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是()

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B．划线操作应在火焰上进行

C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

解析：选D。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培育即可获得所需菌落。

6．“创卫”是创建卫生城市的简称。“卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标记。某同学欲利用所学习的微生物培育学问，通过试验证明痰液中含有细菌，来提倡同学们不要随地吐痰，为“创卫”添一份力。请回答下列问题：

(1)欲培育细菌必需先制备可供细菌生长的培育基。试验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培育基来培育微生物，该培育基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl、________、H2O等；该培育基中微生物所需的氮源来自________；制备该培育基的步骤是：配制培育基→调整pH→分装→包扎→灭菌→倒平板，其中灭菌常用的方法是______________；培育基灭菌后，须要冷却到________℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还须要将平板倒置，主要目的是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(2)为了使试验更有劝服力，该同学设置了