DB21T 2395-2015 稻瘟病菌无毒基因检测 PCR法.pdfVIP

ICS65.020.01

B04

DB21

辽宁省地方标准

21/T23952015

DB—

稻瘟病菌无毒基因检测PCR法

2015-05-18发布2015-07-18实施

辽宁省质量技术监督局发布

DB21/T2395—2015

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由辽宁省农业科学院提出。

本标准由辽宁省农村经济委员会归口。

本标准由辽宁省农业科学院创新中心负责起草。

本标准主要起草人：郑文静、陆晓春、王世维、赵家铭、马丽、丛玲、张丽霞、白春明、王春语、王妍、

朱振兴、李丹、王平、李金红等。

本标准由辽宁省农业科学院创新中心负责解释。

I

DB21/T2395—2015

稻瘟病菌无毒基因检测PCR法

1范围

本标准规定了检测稻瘟病菌（Magnaporthegrisea）无毒基因的检测方法，包括原理、仪器设备、

试剂及样品、防污染措施、实验步骤及结果分析。

本标准适用于稻瘟病菌中无毒基因AVR1-CO39、AVR-Pia、AVR-Pii、AVR-Pik、AVR-Pita和AVR-piz-t

的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

3术语及缩略语

下列术语及缩略语适用于本标准

3.1正向引物：处于DNA双链上游的引物，简称F引物。

3.2反向引物：处于DNA双链下游的引物，简称R引物。

3.3内参引物：在聚合作用起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序

列。

3.4DNA：DeoxyribonucleosidetripHospHate，脱氧核糖核酸。

3.5TE：Tris-Cl、EDTA缓冲液。

3.6TBE：Tris-Cl、硼酸、EDTA缓冲液。

3.7PrimeSTARHSDNAPolymerase：高保真DNA聚合酶。

3.8PrimeSTARBuffer（5×):5×PCR反应液。

3.9dNTP：DeoxyribonucleosidetripHospHate，脱氧核苷三磷酸。

3.10PCR：Polymerasechainreaction。

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DB21/T2395—2015

3.11bp：Basepair，碱基对。

3.12Goldenview：核酸染料，替代溴化乙锭。

3.13DNAMarker：标准分子量的核酸标记。

3.14bp:Basepair,碱基对。

3.15Tris：tris(hydroxymethyl)aminomethane，三羟甲基氨基