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第1课时动物细胞与组织培育细胞核移植技术
1.理解动物细胞与组织培育的原理、方法及应用。(重、难点)
2.理解细胞核移植的基本过程。
3.驾驭动物体细胞克隆的过程和意义。(重点)
4.正确看待克隆的利与弊。
学问点一|动物细胞与组织培育
1.动物细胞工程
(1)理论依据:细胞生物学和分子生物学。
(2)应用
①深化探究并改造生物的遗传特性。
②大量培育细胞。
(3)技术手段:动物细胞与组织培育、细胞核移植、体细胞克隆、细胞融合、单克隆抗体制备等。
(4)基础技术:动物细胞与组织培育。
2.动物细胞与组织培育
(1)概念:指在体外模拟动物体内环境,将动物细胞或组织在温度相宜、养分足够、无菌等条件下培育,使其接着生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。
(2)材料:取自动物胚胎或诞生后不久的幼龄动物的器官或组织。
(3)场所:体外,并模拟动物内环境。
(4)目的:使动物细胞或组织接着生长、增殖并维持原有结构和功能。
eq\a\vs4\al((5)动物,细胞培,养的环,境条件)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(温度:最适温度为36.5℃左右,pH:最适范围为7.2~7.4,气体:O2和CO2的含量不仅影响培育环,境的pH,还干脆影响细胞的代谢活动,养分物质:如葡萄糖、氨基酸、无机盐、微,量元素和促生长因子等))
eq\a\vs4\al((6)动物,细胞与,组织培,养的培,养基分,类)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(\a\vs4\al(自然培,养基)\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(来源:动物血清、动物组织提取液,和鸡胚汁,特点:养分价值高、成分困难等)),\a\vs4\al(合成培,养基)\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(来源:人工配制,特点:成分明确,便于限制试验条件等,,但仍需加入动物血清))))
(7)过程
①动物细胞培育
动物组织eq\o(――――――――――→,\s\up10(用胰蛋白酶处理分散))单个细胞―→细胞悬液―→含养分液的液体培育皿培育―→形成一层细胞―→转移到新培育液中接着培育。
②动物组织培育
eq\a\vs4\al(动物组织―→\b\lc\{\rc\}(\a\vs4\al\co1(a.剪取组织块,b.用生理盐水冲洗,c.将组织块移入培育瓶))\o(\a\al(培育瓶,中贴壁,培育)))
(8)培育类型
①原代培育
a.含义:从供体获得组织或细胞后的初次培育。
b.培育代数:10代左右。
c.应用:药物测试、基因表达等试验探讨。
d.特点:细胞的生物学特性未发生很大变更。
②传代培育
a.含义:将原代培育的细胞分别稀释后转入新的培育瓶中接着培育。
b.缘由:在原代培育过程中,由于培育空间的限制、养分物质的消耗等导致细胞生长和增殖减缓。
c.培育代数:10~50代左右。
(9)应用
主要应用于医药领域,如疫苗生产、药物研制、肿瘤防治等。
eq\a\vs4\al([合作探讨])
对大面积烧伤的病人,最好进行自体皮肤移植手术,为了获得大量的自体皮肤细胞必需进行细胞培育。
结合以上材料探究如下问题:
探讨eq\a\vs4\al(1):动物细胞培育与动物组织培育的主要区分是什么?
提示:动物细胞培育过程中须要用胰蛋白酶等使组织块中的细胞离散,而动物组织培育过程中不须要运用胰蛋白酶等。
探讨eq\a\vs4\al(2):进行动物细胞培育为何常选用幼龄动物组织或胚胎作培育材料?动物细胞培育须要脱分化吗?培育前为什么要将动物组织分散成单个细胞?
提示:幼龄动物组织或胚胎的细胞分化程度低,增殖实力很强,更易于培育。
动物细胞培育不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变弱,失去了发育成完整个体的实力,所以,动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培育时的脱分化过程了。分散后能与培育液充分接触,更易进行物质交换。
eq\a\vs4\al([思维升华])
1.动物细胞培育
(1)原理
细胞增殖。
(2)培育液
动物细胞培育所用的培育液(液体培育基)与植物组织培育所用的培育基的成分是不同的。动物细胞培育液常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
(3)培育条件
①无菌、无毒的环境:首先应保证被培育的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培育液和全部的培育用具进行无菌处理。通常还要在细胞培育液中添加确定量的抗生素,以防培育过程中的污染。另外,应定期更换培育液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
②养分:细胞体外培育所需养分物质与体内的环境基本相同。例如,须要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。将细胞所需的上述养分物质按其种类和所需数量严格配制而成的培育基,称为合成培育基。由于人们对
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