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山东医学高等专科学校
血栓与止血检验
血小板检验
龚晓华
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目录
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一、血小板计数
【测定方法】
1.普通显微镜法:稀释、充池、计数、换算。
PLT/L=5个中方格内的PLT数×109
一、血小板计数
压线细胞:记上不记下,计左不记右
血小板计数区域及计数原则
一、血小板计数
【测定方法】
2.相差显微镜计数法
3.血液分析仪法:电阻抗法
4.流式细胞仪法(ICSH推荐的参考方法)
一、血小板计数
【参考区间】
(125~350)×109/L
一、血小板计数
【临床意义】
①新生儿:较低,3个月后达成人水平。
②日间变化:一天内有6%~10%的变化。清晨低,午后高;进食、运动后高;春低冬高,高原居民高。
③月经早期降低,后期逐渐升高。
④妊娠中晚期升高,分娩后1~2天降低。
⑤动脉血高于静脉血,静脉血高于末梢血。
1.生理性变化
一、血小板计数
【临床意义】
2.病理性变化
血小板
原因
临床意义
减少
生成障碍
急性白血病、再障、骨髓肿瘤、放射性损伤、巨幼细胞性贫血等
破坏过多
特发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、SLE等
消耗过多
DIC、血栓性血小板减少性紫癜等
分布异常
脾大、血液被稀释等
先天性
新生儿血小板减少症、巨大血小板综合征等
增多
原发性
慢粒、原发性血小板增多症、真性红细胞增多症等
反应性
急性化脓性感染、大出血、急性溶血、肿瘤等
其他
外科手术后、脾切除等
二、血块收缩试验
【检测原理】
在一定条件下,按规定的时间观察血块的收缩情况或计算血块的收缩率。主要取决于血小板数量、功能和纤维蛋白原含量。
【临床意义】
血块过度收缩见于因子Ⅷ缺乏症及严重贫血。
2.血块收缩不良或不收缩见于血小板数量减少;血小板功能异常;低纤维蛋白原症、凝血酶原严重减少;多发性骨髓瘤,原发性巨球蛋白症;严重凝血障碍。
二、血块收缩试验
三、血小板黏附试验
【检测原理】
玻珠柱法:利用血小板具有黏附异物表面的特性,当血液通过玻珠柱时,血小板可粘附在充满玻珠的塑料管内,血中血小板数会因此而降低。通过检测玻珠柱两端血液的血小板数量,可以了解血小板在体外粘附于物体表面的能力,以推测血小板粘附作用。
【临床意义】
1.减低见于血管性血友病、巨大血小板综合征、肝硬化、尿毒症、骨髓增生性疾病、血小板抑制剂的使用等。
2.增高见于高凝状态和血栓性疾病、糖尿病、肾小球肾炎妊娠高血压等。
三、血小板黏附试验
四、血小板聚集试验
【检测原理】
通常用比浊法检测。将受检的贫血小板血浆(PPP)调整为最低浊度(最高透光度),而受检的富血小板血浆(PRP)为浊度最高(透光度最低),随之,在PRP中加入诱聚剂,由于血小板的聚集,使受检血浆浊度发生改变,透光度增高,这种混浊的改变通过光电池用电讯号记录下来,根据标计下来的曲线可推算出血小板聚集的程度和速度。
四、血小板聚集试验
【临床意义】
1.减低:血小板无力症、巨大血小板综合征、血小板储存池病等。
2.增高:高凝状态和血栓形成性疾病、糖尿病等。
五、血小板PF3有效性检测
【检测原理】
血小板第3因子(PF3)有效性检测是将正常人和患者富血小板血浆(PRP)和乏血小板血浆(PPP)交叉配合,以白陶土作激活剂,促使血小板第3因子形成,再测定各组标本的凝固时间,比较各组时差,从而得知PF3是否有缺陷。
六、血小板膜糖蛋白检测
【检测原理】
应用抗人血小板膜糖蛋白Ⅰb、Ⅱb、Ⅲb单克隆抗体与被检者血小板膜相应糖蛋白的特异免疫反应,通过放射免疫分析可以定量测定血小板相应糖蛋白的含量。
七、β-TG和P-选择素检测
【检测原理】
血浆β-血小板球蛋白(β-TG)和P-选择素检测,酶标双抗夹心法:用抗β-TG和P-选择素抗体包被酶标反应板,与血浆中抗原发生特异性结合,再加入酶标记的抗β-TG和P-选择素抗体,通过底物显色,其显色的深浅与受检者血浆中β-TG和P-选择素的含量呈正比,从标准曲线中计算出受检者血浆中β-TG和P-选择素含量。
八、血栓烷B2检测
【检测原理】
用血栓烷B2(TXB2)牛血清蛋白包被酶标反应板,与被检血浆或TXB2标准品和抗TXB2抗体竞争性结合。包被TXB2与抗TXB2抗体结合的量与被检血浆中TXB2的含量呈负相关。加入过量酶标记第二抗体,再加底物显色,根据吸光度即可计算出被检血浆中TXB2的含量。
九、血小板相关抗体检测
【检测原理】
血小板相关抗体检测(PAIg):ELISA法,双抗体夹心法
【临床意义】
特发性血小板减少性紫癜(ITP)诊断的指标之一,90%患者增高。
作为ITP观察疗效及预后判断的指标。
十、血小板寿命
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