血红蛋白病异常血红蛋白实验室检查75课件讲解.pptx

山东医学高等专科学校血红蛋白病异常血红蛋白实验室检查血液学检验

异常血红蛋白实验室检查血红蛋白电泳抗碱血红蛋白检测血红蛋白F酸洗脱试验异丙醇沉淀试验热变性试验红细胞包涵体试验

异常血红蛋白实验室检查实验原理根据不同的血红蛋白具不同的电荷，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动；反之，Hb带正电荷向阴极泳动，不同的血红蛋白所带电荷和相对分子量不同，可分离出各自的区带。（一）血红蛋白电泳

异常血红蛋白实验室检查参考区间①pH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳，适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分开，HbH与HbBarts不能分开和显示。②pH6.5TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳主要用于HbH和HbBarts的检出。（一）血红蛋白电泳

异常血红蛋白实验室检查临床意义通过与正常人的血红蛋白电泳图谱进行比较，可发现异常血红蛋白区带。如HbH、HbE、HbBarts、HbS、HbD和HbC等异常血红蛋白。HbA2增多（α2δ2），见于β珠蛋白生成障碍性贫血，HbE病时也在HbA2区带位置处增加，但含量很大。HbA2轻度增加亦可见于肝病、肿瘤和某些血液病。（一）血红蛋白电泳

异常血红蛋白实验室检查胎儿血红蛋白（HbF）具有比HbA更强的抗碱作用，将待检的溶血液与一定量的NaOH溶液混合，作用1分钟后加入半饱和硫酸铵中止碱变性反应。HbF抗碱变性作用强，没有变性存在于上清中，而HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。实验原理（二）抗碱血红蛋白检测

异常血红蛋白实验室检查成人2%，新生儿40%参考区间（二）抗碱血红蛋白检测

异常血红蛋白实验室检查成人2%，新生儿40%参考区间（二）抗碱血红蛋白检测

异常血红蛋白实验室检查1.HbF绝对增多珠蛋白生成性贫血时HbF增加，重型者达30%～90%，中间型常为5%～30%，轻型小于5%。遗传性胎儿血红蛋白持续综合征患者，HbF可高达100%。2.HbF相对增多某些血液疾病。3.HbF生理性增多多见于孕妇及新生儿。临床意义（二）抗碱血红蛋白检测

异常血红蛋白实验室检查HbF具有抗碱和抗酸作用，其抗酸能力比HbA强。将血涂片于酸性缓冲液中孵育，含HbF的红细胞不被酸洗脱，可被伊红染成红色，而含HbA的红细胞均被酸洗脱，不能被伊红着色。实验原理（三）血红蛋白F酸洗脱试验

异常血红蛋白实验室检查正常血片含HbF的着色红细胞0.02（2%）；孕妇可有轻度增加。参考区间（三）血红蛋白F酸洗脱试验

异常血红蛋白实验室检查珠蛋白生成障碍性贫血着色细胞增加，重型患者大多数红细胞染成红色，轻型患者可见少数染成红色的细胞。遗传性胎儿血红蛋白持续综合征全部红细胞均染为红色。临床意义（三）血红蛋白F酸洗脱试验

异常血红蛋白实验室检查异丙醇是非极性溶剂能降低血红蛋白分子内部氢键，不稳定血红蛋白更快地裂解沉淀。通过观察血红蛋白液在异丙醇中的沉淀现象对不稳定血红蛋白进行筛检。实验原理（四）异丙醇沉淀试验

异常血红蛋白实验室检查不稳定血红蛋白存在时，常于5分钟时出现沉淀，20分钟开始出现绒毛状沉淀。血液中含有较多HbF、HbH、HbE时也可出现阳性结果。参考区间（四）异丙醇沉淀试验正常人血红蛋白液为阴性（30分钟内不沉淀）。临床意义

异常血红蛋白实验室检查不稳定血红蛋白比正常血红蛋白更容易遇热变性，观察血红蛋白液在50℃时是否出现沉淀，对不稳定血红蛋白进行筛检。实验原理（五）热变性试验

异常血红蛋白实验室检查血红蛋白沉淀率增加，说明不稳定血红蛋白的存在。参考区间（五）热变性试验正常人热沉淀的血红蛋白1%。临床意义

异常血红蛋白实验室检查将煌焦油蓝液与新鲜血液一起孵育，不稳定血红蛋白易变性沉淀形成包涵体。观察温育2h含包涵体的红细胞是否比温浴10min的阳性细胞多，可了解是否有HbH等不稳定血红蛋白的存在。实验原理(六）红细胞包涵体试验

异常血红蛋白实验室检查参考区间(六）红细胞包涵体试验正常人0.01（1%）。

异常血红蛋白实验室检查1.不稳定血红蛋白病孵育1～3小时多数红细胞内可出现变性珠蛋白肽链沉淀形成的包涵体。G-6-PD缺乏或细胞还原酶缺乏及化学物质中毒等，红细胞中也可出现包涵体。2.HbH病孵育1小时就可出现包涵体，也叫HbH包涵体。(六）红细胞包涵体试验临床意义

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