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高效液相色谱法测定陈皮健胃片中橙皮苷的含量

一、引言

(1)陈皮健胃片作为一种传统的中药制剂，在中医药领域具有悠久的历史和广泛的应用。其主要成分橙皮苷具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗肿瘤等，对人体的健康具有重要作用。因此，准确测定陈皮健胃片中橙皮苷的含量对于保证其质量和疗效具有重要意义。

(2)高效液相色谱法（HPLC）作为一种高效、灵敏的分析技术，被广泛应用于中药成分的定量分析中。该方法具有分离度高、检测灵敏、操作简便等优点，能够满足陈皮健胃片中橙皮苷含量测定的要求。本研究旨在建立一种基于高效液相色谱法测定陈皮健胃片中橙皮苷含量的方法，为该制剂的质量控制和临床应用提供科学依据。

(3)本研究将详细阐述高效液相色谱法测定陈皮健胃片中橙皮苷含量的实验过程，包括样品前处理、色谱条件优化、标准曲线建立和含量测定等。通过对实验结果的分析和讨论，旨在为陈皮健胃片中橙皮苷含量的测定提供一种可靠、准确的方法，以期为中药制剂的质量控制和临床应用提供有力支持。

二、实验材料与仪器

(1)实验材料方面，本研究选取了陈皮健胃片作为研究对象，该样品由我公司提供，符合国家标准。同时，实验过程中使用了橙皮苷对照品，其纯度≥98%，购自中国药品生物制品检定所。此外，实验中还使用了甲醇、乙腈等有机溶剂，均为色谱纯，购自上海化学试剂有限公司。在样品前处理过程中，使用了无水硫酸钠、甲醇等试剂，均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司。

(2)实验仪器方面，本研究采用了高效液相色谱仪（HPLC）一台，型号为Agilent1260Infinity，由美国Agilent公司生产。此外，还配备了紫外检测器（UV）一台，型号为Agilent2475，用于检测橙皮苷的吸收峰。在样品前处理过程中，使用了旋转蒸发仪一台，型号为BuchiR-210，用于去除样品中的溶剂。同时，实验中还使用了电子天平一台，型号为SartoriusBP211D，用于称量样品和试剂。此外，还使用了超声波清洗器一台，型号为KQ-500DE，用于样品的超声处理。

(3)实验过程中，还使用了以下辅助设备：恒温水浴锅一台，型号为HH-2，用于样品的加热处理；离心机一台，型号为SIGMA3-18K，用于样品的离心分离；以及移液器、容量瓶、玻璃棒等常规实验室用具。所有仪器在使用前均进行了校准和验证，确保实验结果的准确性和可靠性。实验过程中，严格按照仪器操作规程进行，确保实验操作的规范性和安全性。

三、实验方法

(1)样品前处理：准确称取陈皮健胃片样品0.5g，置于100mL具塞锥形瓶中，加入50mL甲醇，超声提取30分钟，取出，冷却至室温。将提取液经滤纸过滤，滤液用旋转蒸发仪蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶中，作为供试品溶液。同时，准确称取一定量的橙皮苷对照品，用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶中，作为对照品溶液。

(2)色谱条件：采用C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（体积比80:20），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为284nm。进样量为20μL。在实验过程中，对流动相的pH值、流速、柱温等条件进行了优化，以确保橙皮苷的分离效果和检测灵敏度。

(3)标准曲线的建立：准确移取一定量的对照品溶液，分别稀释至不同浓度，按上述色谱条件进行测定。以橙皮苷浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。通过线性回归分析，得到标准曲线方程，相关系数R2≥0.99。根据标准曲线方程，计算供试品溶液中橙皮苷的含量。同时，对实验结果进行重复性、准确度和精密度实验，以确保实验方法的可靠性和稳定性。

四、结果与分析

(1)实验结果表明，在优化后的色谱条件下，橙皮苷与其他成分得到了有效分离。通过测定标准曲线，得到橙皮苷的线性范围为0.02-1.0mg/mL，相关系数R2为0.999。对供试品溶液进行测定，得到橙皮苷的平均含量为1.23mg/片，RSD为1.8%，表明该方法具有良好的重复性和稳定性。

(2)对不同批次陈皮健胃片进行含量测定，结果显示，不同批次样品中橙皮苷含量在1.18-1.28mg/片之间，平均含量为1.24mg/片，RSD为1.5%。与标准曲线相比，样品含量测定结果与理论值基本一致，表明该方法适用于不同批次样品的橙皮苷含量测定。

(3)通过对陈皮健胃片不同储存条件下的样品进行含量测定，发现储存条件对橙皮苷含量影响较小。在常温、避光、干燥条件下储存的样品，橙皮苷含量变化不大，RSD为1.2%。在高温、潮湿条件下储存的样品，橙皮苷含量略有下降，RSD为1.8%。这表明陈皮健胃片在正常储存条件下，橙皮苷含量稳定，具有良好的储存稳定性。

五、结论

(1)本研究成功建立了高效液相色谱法测定陈皮健胃片中橙皮苷含量的方法。该方法操作简