食品中黄曲霉毒素的测定.docxVIP

PAGE

1-

食品中黄曲霉毒素的测定

一、引言

(1)黄曲霉毒素（Aflatoxins，AFs）是一类由黄曲霉（Aspergillusflavus）和寄生曲霉（Aspergillusparasiticus）等某些菌株产生的真菌毒素，广泛存在于受污染的谷物、油料种子、坚果和粮食产品中。黄曲霉毒素具有高度毒性和致癌性，世界卫生组织（WHO）将其列为一级致癌物。据统计，全球每年约有10亿人口暴露于黄曲霉毒素中，尤其在发展中国家，由于食品安全监管不严格，黄曲霉毒素污染问题尤为严重。

(2)黄曲霉毒素的污染不仅对人类健康构成严重威胁，也对农业和食品产业带来巨大经济损失。例如，2018年，我国某地区花生米因黄曲霉毒素B1（AFB1）超标，导致约1.5万吨花生米被召回，直接经济损失高达数百万元。此外，黄曲霉毒素污染还可能影响食品的国际贸易，如2014年，我国出口到欧盟的茶叶因黄曲霉毒素超标被拒绝入境，造成了严重的经济损失和信誉损害。

(3)鉴于黄曲霉毒素的危害性，各国政府和国际组织对食品中黄曲霉毒素的检测和控制都给予了高度重视。我国《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）规定，花生、花生油、玉米等食品中黄曲霉毒素B1的限量分别为20μg/kg、10μg/kg和5μg/kg。为了确保食品安全，提高公众健康水平，食品中黄曲霉毒素的检测技术不断发展和完善，检测方法的研究和应用成为食品安全领域的重要课题。

二、黄曲霉毒素概述

(1)黄曲霉毒素是一类具有高度毒性和致癌性的真菌代谢产物，主要由黄曲霉属和寄生曲霉属的某些菌株产生。这些毒素在自然界中广泛存在于被黄曲霉污染的食品中，如花生、玉米、稻谷、豆类、坚果和奶制品等。黄曲霉毒素的化学结构复杂，主要包括B1、B2、G1、G2、M1和M2等六种类型，其中B1的毒性和致癌性最强。

(2)黄曲霉毒素的毒性主要体现在对肝脏的损害，能够导致肝脏细胞损伤、炎症甚至肝癌。研究表明，黄曲霉毒素的致癌作用可能与DNA的损伤和修复机制的异常有关。长期摄入低剂量的黄曲霉毒素可导致慢性肝损伤和肝癌风险增加。世界卫生组织（WHO）和国际癌症研究机构（IARC）均将黄曲霉毒素B1列为人类致癌物。

(3)黄曲霉毒素的污染问题在全球范围内普遍存在，尤其在发展中国家，由于储藏条件、加工工艺和食品安全监管等因素，黄曲霉毒素的污染风险较高。为了确保食品安全，降低黄曲霉毒素的摄入风险，各国政府和国际组织制定了相应的食品安全标准和检测方法。例如，我国《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）对多种食品中的黄曲霉毒素含量制定了明确的限量标准，以保障公众健康。同时，食品生产者和监管机构应加强对黄曲霉毒素的检测和控制，从源头减少污染风险。

三、黄曲霉毒素检测方法

(1)黄曲霉毒素的检测方法主要包括化学法、免疫法、分子生物学法和仪器分析法。其中，化学法是最传统的检测方法，如薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）。例如，TLC法在食品中黄曲霉毒素的初步筛选和定量分析中应用广泛，但其灵敏度较低，难以满足现代食品安全检测的要求。而HPLC法具有高灵敏度和准确度，可检测到极低浓度的黄曲霉毒素，但在检测过程中需要复杂的样品前处理和高效分离柱。

(2)免疫法基于抗原抗体特异性结合的原理，具有快速、简便、灵敏等优点。如酶联免疫吸附测定（ELISA）法，是目前最常用的黄曲霉毒素检测方法之一。据统计，ELISA法在食品、饲料和农产品中的黄曲霉毒素检测中占市场份额的70%以上。ELISA法的检测限可达到ng/g级别，但存在交叉反应和假阳性等问题。近年来，随着纳米技术和生物技术的发展，基于纳米材料的免疫传感器在黄曲霉毒素检测中的应用逐渐增多，展现出更高的灵敏度和特异性。

(3)分子生物学法，如聚合酶链反应（PCR）和实时荧光定量PCR（qPCR），通过检测黄曲霉毒素基因或毒素代谢产物来实现对黄曲霉毒素的检测。例如，实时荧光定量PCR法在检测食品中黄曲霉毒素B1时，具有高灵敏度和特异性，检测限可达到pg/g级别。此外，分子生物学法还可以用于检测黄曲霉毒素的基因突变和耐药性。然而，分子生物学法在操作上相对复杂，需要专业的实验技术和设备。在实际应用中，分子生物学法通常与免疫法或化学法结合，以提高检测的准确性和可靠性。例如，某研究团队利用PCR和ELISA法联合检测玉米样品中的黄曲霉毒素B1，检测结果与HPLC法相比，具有较高的相关性。

四、实验步骤与操作要点

(1)黄曲霉毒素检测实验的第一步通常是样品的前处理，这一步骤至关重要，因为它直接影响到后续检测的准确性和灵敏度。样品前处理通常包括研磨、提取和净化。以玉米样品为例，首先将玉米样品研磨成粉末，然后使用有机溶剂（如乙腈）进行提取。提取过程中，通常需要加入一定