鱼类血液涂片制作和血细胞计数培训课件.pptxVIP

鱼类血液涂片制作和血细胞计数

血液具有维持生物体内环境稳态de作用,正常情况下血液中dede各项生理指标处于相对稳定de状态,同时各项指标也能够反映一个生物个体de健康程度,因而血液检测已成为疾病检测最基本de技术.多种多样de血液检测仪2鱼类血液涂片制作和血细胞计数

血液检测能够辅助疾病诊断3鱼类血液涂片制作和血细胞计数

血涂片de显微检查是血液细胞学检查de基本方法,也是生物显微制片de基本方法之一,临床上应用极为广泛,特别是对于各种血液病de诊断具有重要de价值.制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好de血涂片是血液学检查de重要基本技术.人体血液涂片4鱼类血液涂片制作和血细胞计数

血液涂片技术在水产动物疾病检测过程中也有非常重要de作用,比如细菌感染、病毒感染以及血液寄生虫疾病de检测.目前该技术已成为水产技术从业人员de必备技能,也是执业资格考试de重点内容.5鱼类血液涂片制作和血细胞计数

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涂片经瑞氏-吉姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同de着色,从而达到辨别其形态特征de目de.一般细胞de细胞核嗜碱性,能被碱性燃料染成蓝色,而细胞质基质嗜酸性,能被酸性燃料染成红色.8鱼类血液涂片制作和血细胞计数

血细胞计数法是将小量待测样品血液de悬浮液置于一种特别de具有确定面积和容积de载玻片上（又称细胞计数板）,于显微镜下直接计数,根据血液稀释de倍数,进一步推算出血液中血细胞数de一种方法.9鱼类血液涂片制作和血细胞计数

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鱼类麻醉前后对比示意图13鱼类血液涂片制作和血细胞计数

二、血液de采集将准备好de二mL注射器,抽动活塞用肝素钠溶液将注射器内湿润,为血液de采集做好准备工作.血液de采集按实验二de采血方法进行,采好de血液保存于一.五mL离心管中待用.14鱼类血液涂片制作和血细胞计数

三、推片取一块边缘光滑de载片做推片.将其一端刮取血滴,迅速使血液均匀分散在推片与载片de接触处.然后使推片与载片呈三零°～四零°,向另一端平稳地推出,涂片推好后,放置于空气中使之自然干燥.（一）将采出de血液滴在载片上15鱼类血液涂片制作和血细胞计数

（二）另一张边缘光滑de双凹片,斜置于血滴de前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线状.16鱼类血液涂片制作和血细胞计数

（四）血涂片18鱼类血液涂片制作和血细胞计数

不良血涂片19鱼类血液涂片制作和血细胞计数

四、血涂片染色先将干燥血片用甲醇固定三-五分钟,将固定de血片置于被pH六.四-六.八磷酸盐缓冲液稀释一零-二零倍de吉姆萨染液中,浸染五分钟（标本较少可用滴染法）,取出用蒸馏水冲洗,再用伊红复染一分钟,用蒸馏水冲洗,待干后镜检.20鱼类血液涂片制作和血细胞计数

冲洗后滴加少量伊红,染色一分钟直接流水冲洗一分钟（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥后镜检涂片干燥后加吉姆萨染液染色五分钟21鱼类血液涂片制作和血细胞计数

二、血细胞计数血细胞计数板de结构XB-K-二五为计数板de型号和规格,表示此计数板分二五个中格.零.一mm为盖上盖玻片后计数室de高；一/四零零mm二表示计数室面积是一mm二,分为四零零个小格,每小格面积是一/四零零mm二.22鱼类血液涂片制作和血细胞计数

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一、血液稀释用一零微升移液枪取一零微升血液于一新de一.五mL离心管中,再用一零零零微升移液枪吸九九零微升生理盐水于离心管中（稀释一零零倍）,轻轻颠倒混匀.二、计数板处理用无水乙醇或九五%乙醇溶液擦拭计数板后,用绸布擦净,另擦净盖玻片一张,把盖片覆在计数板上面.三、充液取干净de计数板平放于实验桌上,将盖玻片置入计数板正中央.用毛细血管吸取已稀释混匀后de血细胞悬浮液,并将管尖轻轻斜置于盖玻片边缘,让血细胞悬液缓慢流出,借毛细管现象而自动流入计数室内.24鱼类血液涂片制作和血细胞计数

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四、静置血细胞悬液充入计数室后,静置二～三分钟,待细胞不再浮动后,于低倍镜下观察计数室内待计数de血细胞分布是否均匀,分布均匀者,方可计数.26鱼类血液涂片制作和血细胞计数

五、按图计算计数板de四角大方格（每个大方格又分一六个小方格）内de细胞数.计数时,只计数完整de细胞,若聚成一团de细胞则按一个细胞进行计数.在