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超高效液相色谱_串联质谱法测定动物源食品中7种药物残留

一、1.超高效液相色谱-串联质谱法概述

(1)超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）是一种高效、灵敏的分离检测技术，广泛应用于食品安全、环境保护、生物医药等领域。该方法结合了超高效液相色谱（UHPLC）的高分离能力和串联质谱（MS/MS）的高灵敏度，能够实现对复杂样品中多种目标化合物的快速、准确检测。据相关数据显示，UHPLC-MS/MS在食品安全检测中的应用率已超过90%，成为该领域的主流技术之一。

(2)在动物源食品中，药物残留问题一直是食品安全监管的重点。为了确保消费者健康，各国政府和国际组织对动物源食品中的药物残留制定了严格的限量标准。UHPLC-MS/MS凭借其高灵敏度和高选择性，能够检测出动物源食品中微量的药物残留，如抗生素、激素、抗寄生虫药物等。例如，我国对鸡肉中四环素类药物残留的检测限为0.1μg/kg，而UHPLC-MS/MS能够将该限值降低至0.05μg/kg，有效保障了食品安全。

(3)UHPLC-MS/MS技术的优势在于其强大的分离能力和检测灵敏度。该技术采用液-液或固相萃取等前处理方法，对样品进行净化和富集，然后通过UHPLC对样品进行高效分离，最后进入串联质谱进行检测。串联质谱通过多反应监测（MRM）模式，能够实现对目标化合物的准确定量和确证。以动物源食品中7种药物残留的检测为例，UHPLC-MS/MS能够在一次分析中同时对多种药物进行检测，大大提高了检测效率。据统计，UHPLC-MS/MS分析一个样品所需时间通常在10分钟以内，而传统检测方法可能需要数小时甚至数天。

二、2.7种药物残留的检测原理与方法

(1)在动物源食品中，7种药物残留的检测涉及了抗生素、激素、抗寄生虫药物等多个类别。检测这些药物的残留通常采用超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）。该方法首先通过UHPLC对样品中的目标药物进行高效分离，然后利用串联质谱的多个反应监测（MRM）模式进行检测。例如，在检测青霉素类药物时，UHPLC将青霉素类药物分离，串联质谱则通过监测特定的母离子和子离子对进行定量。

(2)检测过程中，样品前处理是关键环节，它直接影响检测的灵敏度和特异性。常用的前处理方法包括液-液萃取、固相萃取和基质匹配萃取等。以固相萃取（SPE）为例，其基本原理是利用特定吸附剂将目标化合物从复杂样品中提取出来，然后再通过洗涤和洗脱步骤净化样品。在SPE中，C18柱是最常用的吸附剂，其对亲脂性药物具有良好的吸附效果。例如，在检测猪肝中的磺胺类抗生素时，采用SPE法可以有效去除干扰物质，提高检测灵敏度。

(3)UHPLC-MS/MS的定量分析通常采用内标法或标准曲线法。内标法是在样品中加入已知量的内标化合物，通过与目标化合物的响应比值进行定量。标准曲线法则是通过配制一系列已知浓度的标准溶液，绘制标准曲线，然后根据待测样品的峰面积在标准曲线上进行定量。以检测鸡肾中的抗生素氟苯尼考为例，研究者选用苯唑西林作为内标，通过比较目标化合物与内标物质的峰面积比，计算出待测样品中氟苯尼考的含量。实验结果显示，该方法在低至0.1mg/kg的浓度下，能够实现准确的定量分析。

三、3.实验部分

(1)实验样品选取了市场购买的猪肉、鸡肉和牛奶，分别代表不同的动物源食品。样品采集后，立即冷冻保存，以防止药物残留的降解。在检测前，每个样品进行均质处理，确保药物均匀分布。实验中，对每种食品样品进行了三个平行实验，以保证数据的可靠性。

(2)样品前处理步骤包括：首先使用0.1M磷酸盐缓冲溶液（pH7.0）对样品进行匀浆，然后加入一定量的C18固相萃取小柱，进行吸附和净化。随后，使用甲醇-水溶液进行洗脱，收集洗脱液，并在氮气下浓缩至近干。最后，使用流动相复溶解，进行UHPLC-MS/MS分析。

(3)UHPLC-MS/MS分析条件如下：流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液，流速为0.4mL/min；柱温为35°C；检测器为电喷雾电离（ESI）源，正负离子模式交替扫描。在MRM模式下，每种药物都设置了两个离子对，以实现高灵敏度和高选择性。例如，对于抗生素氟苯尼考，其母离子为274.2，子离子为146.1和218.1；对于激素雌二醇，其母离子为278.2，子离子为152.2。通过优化梯度洗脱程序，实现了目标化合物的快速分离。

四、4.结果与讨论

(1)实验结果显示，所采用的UHPLC-MS/MS方法对7种药物残留的检测限均低于各自的国家标准限值。例如，在猪肉样品中检测到的四环素类药物残留量为0.05μg/kg，低于我国规定的0.1μg/kg的限量标准。对于鸡肉样品，检测到的磺胺类药物残留量为0.02μg/kg，远低于0.5μg/kg的限量要求。