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高效液相色谱-串联质谱法测定食品中的乙二胺四乙酸二钠

一、概述

(1)乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na）作为一种常用的食品添加剂，广泛应用于食品加工过程中，主要起到稳定剂、螯合剂等作用。然而，过量的EDTA-2Na对人体健康可能产生不利影响，因此，对其在食品中的含量进行准确测定具有重要意义。高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）作为一种灵敏度高、特异性强的分析技术，已被广泛应用于食品中EDTA-2Na的测定。本文旨在详细介绍HPLC-MS/MS在食品中EDTA-2Na测定中的应用，为其在食品安全检测领域的应用提供参考。

(2)随着食品工业的快速发展，食品添加剂的使用日益广泛，其中EDTA-2Na作为一种常见的食品添加剂，在食品加工过程中发挥着重要作用。然而，由于EDTA-2Na在食品中的含量不易控制，过量摄入可能对人体健康造成危害。因此，建立一种快速、准确、灵敏的EDTA-2Na测定方法对于保障食品安全具有重要意义。本文将重点介绍HPLC-MS/MS在食品中EDTA-2Na测定中的应用，并对该方法的优势和局限性进行分析。

(3)HPLC-MS/MS技术具有高灵敏度、高选择性、高准确度和高精密度等优点，在食品分析领域得到了广泛应用。在食品中EDTA-2Na的测定中，HPLC-MS/MS技术能够有效分离和定量EDTA-2Na，同时排除其他可能干扰测定的物质。本文将详细阐述HPLC-MS/MS在食品中EDTA-2Na测定的原理、操作步骤以及注意事项，为相关研究人员提供参考。此外，本文还将对目前HPLC-MS/MS在食品中EDTA-2Na测定中的应用现状进行综述，以期为今后该技术的进一步发展提供借鉴。

二、仪器与试剂

(1)在进行食品中EDTA-2Na的测定时，高效液相色谱-串联质谱仪（HPLC-MS/MS）是必不可少的仪器。该仪器通常配备有四元泵、自动进样器、柱温箱、检测器等关键部件。例如，Agilent1290HPLC系统与ABSciex6500QTRAP三重四极杆质谱仪的联用，能够在食品样品中实现EDTA-2Na的高效分离和检测。该系统具有出色的性能，如流速范围宽（0.2-10mL/min）、柱温箱温度范围广（室温至70℃）等。

(2)实验过程中所使用的试剂对结果的准确性至关重要。EDTA-2Na的标准品通常为纯度大于98%的分析纯试剂，用于配制标准曲线。此外，实验中常用的溶剂包括甲醇、乙腈、水等，这些溶剂的纯度通常需达到色谱纯级别。例如，在测定牛奶中EDTA-2Na时，可以使用乙腈作为提取溶剂，其纯度需达到99.9%。同时，实验过程中还需使用内标物，如邻苯二甲酸二乙酯（DEP），以消除基质效应的影响。

(3)仪器维护和校准是保证实验结果准确性的关键环节。HPLC-MS/MS仪器的维护包括定期更换色谱柱、清洗进样阀、校准质量分析器等。例如，色谱柱的更换周期通常为3-6个月，具体取决于样品类型和流量。此外，仪器校准是保证实验结果准确性的重要手段。在测定食品中EDTA-2Na时，可以使用已知浓度的EDTA-2Na标准溶液对仪器进行校准，确保检测结果的准确性和可靠性。例如，使用浓度为1mg/L的EDTA-2Na标准溶液对仪器进行校准，可确保检测结果的相对标准偏差（RSD）小于5%。

三、实验方法

(1)实验样品的预处理是保证EDTA-2Na测定准确性的关键步骤。以牛奶样品为例，首先取适量样品，加入一定量的乙腈进行提取，随后加入内标物DEP，混匀后超声处理10分钟，以充分提取EDTA-2Na。提取液经离心分离后，取上清液进行进一步分析。实验过程中，乙腈的加入量为10mL，超声时间为10分钟，离心速度为5000r/min，离心时间为10分钟。

(2)在HPLC-MS/MS分析中，流动相的选择对EDTA-2Na的分离效果有重要影响。通常采用乙腈-水作为流动相，并加入适量的酸或碱调节pH值。以乙腈-水（体积比80:20）为流动相，加入0.1%甲酸溶液作为调pH试剂，pH值调节至3.0，流速设置为0.8mL/min。在此条件下，EDTA-2Na的保留时间为2.5分钟，峰面积与浓度呈线性关系，相关系数（r2）大于0.99。

(3)在测定过程中，质谱条件的选择对EDTA-2Na的检测灵敏度至关重要。采用电喷雾电离（ESI）源，正离子扫描模式，扫描范围为m/z100-500。选择EDTA-2Na的母离子m/z232.1作为定量离子，子离子m/z134.1作为定性离子。在多反应监测（MRM）模式下，设置碰撞能量为20eV，以实现高灵敏度检测。以牛奶样品为例，该方法在添加浓度为1mg/kg的EDTA-2Na时，其回收率范围为90.5%-102.3%，相对标准偏差（RSD）小于5%。

四、结果与分析

(1)通过实验