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摘要
由于重金属不可降解、且可以在生物体内富集,因此其潜在的生态毒性受到越来越
广泛的关注。其中,Pb由于其较高的环境丰度和广泛的生物毒性成为受关注的重金属
之一。大量研究表明,Pb经吸收后可以直接靶向动物的细胞组分,引起氧化损伤和代
谢紊乱等细胞毒性,进而影响水生动物的生长、发育、行为、生殖和生理活性等诸多方
面。此外,近年来越来越多的研究开始关注动物共生菌群在毒理过程中的作用,这是因
为共生菌群在动物宿主的健康、营养和代谢等方面发挥着重要作用。当前,尽管我们对
于Pb的环境毒性及其机制的认识逐渐加深,但仍存在关键性的问题尚未阐明,包括:1)
较少研究通过野外数据来评估重金属Pb在自然条件下是否会对动物的生理状态和肠道
菌群造成影响;2)较少有研究关注Pb污染系统中不同生态元素之间的变化关系(如,
动物、共生菌群和环境因子等);3)多数Pb毒性的室内研究忽略了阴离子对实验结果
的影响(如,Pb(NO)中NO-的效应)。因此,针对上述研究不足,我们首先以中华蟾
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蜍(Bufogargarizans)蝌蚪为对象,研究了成都平原16个环境点位底泥与表层水中10
种重金属(如,Pb、Cd和Cr等)含量与该区域环境微生物(底泥与表层水菌群)、蝌
蚪肠道微生物以及蝌蚪生理指标之间的空间关联,并进行室内验证。然后我们以峨眉林
蛙(Ranaomeimontis)蝌蚪为对象,通过空白、NaNO3处理组(120和240μg/LNO3-)
和Pb(NO)处理组(200和400μg/LPb2+;120和240μg/LNO-)的组间对比,结合多
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组学手段解析Pb对蝌蚪及环境水质的影响,并重点解析共生菌群在Pb生态毒性中的核
心作用。本研究的主要发现如下:
在自然环境中,不同采样点的环境菌群(表层水与底泥菌群)、蝌蚪肠道共生菌群、
和蝌蚪相对肠重(肠重与体重之比)差异显著,且与环境底泥中的重金属含量显著相关;
其中,Pb较其他重金属对这些指标的组间变化具有更大的解释率,提示自然环境下Pb
是影响水体环境微生物与动物的重要因素。
在自然环境中,Pb对环境菌群、蝌蚪肠道菌群、以及蝌蚪生理状态的影响具有级
联效应。具体而言,底泥中的Pb含量与底泥中环境菌群的组成和结构变化显著相关,
而底泥中环境菌群作为蝌蚪肠道菌群的重要来源,其变化引起了蝌蚪共生菌群的改变,
而蝌蚪共生菌群的变化与蝌蚪相对肠重显著相关。这些结果揭示了“环境菌群-肠道共生
菌群-蝌蚪生理”的Pb毒理途径。
在室内条件下,我们发现Pb(NO)可以显著影响蝌蚪的生理状态、代谢稳态、肠道
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菌群、以及环境水质。Pb对蝌蚪及其共生菌群的影响随物种不同而不同,比如,200μg/L
Pb促进中华蟾蜍蝌蚪的生长,却抑制峨眉林蛙蝌蚪的生长;Pb对蟾蜍蝌蚪肠道菌群的
主要影响是降低假单胞菌属(Pseudomonas)与鲸杆菌属(Cetobacterium)的相对丰度,
而对峨眉林蛙蝌蚪肠道菌群的主要影响是降低厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度。与野
外研究一致,肠道菌群在Pb的毒理学过程中发挥关键作用,其与宿主的代谢谱、生理
状态具有显著关联,且同时介导Pb对环境水质的影响,增加环境中的亚硝酸盐含量。
在室内条件下,我们发现Pb(NO)的毒理学效应很可能是Pb2+和NO-的共同作用。
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以空白和NaNO3处理组为对照,我们发现Pb可以影响峨眉林蛙蝌蚪的脂肪酸代谢、前
列腺素代谢以及糖代谢。有趣的是,Pb2+和NO3-离子可能对蝌蚪具有相反的影响,包括
对峨眉林蛙蝌蚪发育的影响、对蝌蚪组织中糖代谢的影响等,尤其在对肠道共生菌群的
影响上最为明显。这些结果表明,研究重金属无机化合物的生态毒性需要考虑阴离子的
作用。
综上所述,我们的研究结果证实了自然环境中环境重
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