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奶牛性控胚胎移植技术规程

1范围

本文件规定了奶牛性控胚胎生产和移植技术的术语和定义、技术操作要求和方法。本文件适用于奶牛性控胚胎生产、移植技术推广应用的规范化操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3157-2008中国荷斯坦牛

GB/T31582-2015牛性控冷冻精液

NY/T34-2004奶牛饲养标准

NY/T815—2004肉牛饲养标准

NY/T1445-2007奶牛胚胎移植技术规程

DB64/T528-2008奶牛性控冷冻精液人工授精技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1性控胚胎sexedembryos

选择生产性能优良、遗传性能稳定的供体牛进行超数排卵处理，发情后用性别控制精液进行人工授精，供体牛在配种后6d～7d回收的早期胚胎。

3.2胚胎移植embryotransplantation

选择与供体牛生理状况相近的受体牛，用非手术方法将胚胎移植到受体牛子宫角内，以便胚胎继续发育。

4性控胚胎生产

4.1供体牛的选择与饲养管理

4.1.1供体牛符合GB/T3157-2008中荷斯坦奶牛标准，系谱档案完整，体型线性评分良好。成年母牛

选择参加奶牛生产性能测定（DHI）,生产性能优良的牛只，或经遗传评估（EBV），具有较好育种价值的牛只；青年母牛选择全基因组检测（GEBV）,具有较好育种价值，或其父母生产性能优良的牛只。

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4.1.2供体牛要求体格健壮，无遗传缺陷。饲养环境的舒适、稳定，避免出现疫苗注射等应激反应。

保证科学、合理、平衡的日粮营养。超数排卵前一个月，适量补充复合维生素、微量元素，适量增加精料，保证超排期间体重处于增重状态。饲养标准按照NY/T34-2004执行。具体要求按照NY/T1445-2007中5.1.1和5.1.2的规定执行。

4.2种公牛的性控冷冻精液的选择

根据供体牛选种选配的要求，选择谱系清楚，检疫合格，遗传性状稳定，生产性能优良的验证种公牛性控冷冻精液与供体牛进行选配。性控冷冻精液质量符合GB/T31582-2015的规定。

4.3供体牛的超数排卵

4.3.1季节选择

应尽量避开酷暑和严寒时节，以春秋季节为宜。

4.3.2激素选择

超数排卵选用的生殖激素名称、类型、注射剂量及功能见附录A。

4.3.3超数排卵方案

不考虑供体牛的发情时间，避开发情期。应用CIDR＋FSH＋PGF2α法进行超数排卵处理。使用专用CIDR枪将CIDR送至供体牛子宫颈口处。以放置CIDR之日作为0d记，在7d～9d开始，采用连续4d递减注射法肌肉注射FSH。每天间隔12h注射2次，连续注射4d。

在第5次和第6次注射FSH的同时注射0.2mgPGF2α;在第6次注射FSH后取出CIDR，用50ml生理盐水分别溶解青霉素320万IU和链霉素100IU，混合后冲洗供体阴道。具体操作程序见附录B.1。

4.4供体牛的人工授精

4.4.1供体牛发情鉴定

在第8次注射FSH后，每隔4h观察一次发情，每次0.5h以上。以母牛站定接受其它牛爬跨做为发情的标准，做好供体牛发情记录。

4.4.2人工授精时间与次数

人工授精时间尽量接近排卵期。发情后12h进行第1次输精，同时肌肉注射0.05mgLHRH-A3；间隔8h～10h进行第2次输精，如果还有大量卵泡没有排放，肌肉注射0.05mgLHRH-A3，间隔8h～10h后第3次输精。每次输精使用2支性控冷冻精液，分别输配至左右两侧子宫角大弯处。具体操作程序见附录B.2。人工授精操作按照DB64/T528-2008规定执行。

4.5性别控制胚胎的回收（采集）及处理

4.5.1准备工作

在供体牛发情后的第6d，准备好检胚实验室。检胚实验室要求清洁消毒，温度20℃~25℃,相对湿度40%～60%。提前准备好胚胎回收所用器械设备清洗、消毒灭菌、试剂耗材准备等工作。器械设备和试剂耗材准备要求见附录C、附录D。具体操作方法按照NY/T1445-2007中附录C中的规定执行。

4.5.2回收与检胚

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在供体牛发情后的第7