2024_2025学年高中生物第2章克隆技术第6课时动物的克买学案浙科版选修3.docxVIP

PAGE

PAGE13

第6课时动物的克隆(Ⅱ)

[学习目标]1.简述动物的细胞融合技术及应用。2.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的缘由。3.简述动物细胞核移植的概念和程序。4.列举动物细胞培育与动物细胞核移植的应用和发展前景。

一、动物的细胞融合技术及其应用

1.细胞融合与细胞杂交

(1)细胞融合

①含义：指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。

②促融方法：灭活的仙台病毒、聚乙二醇介导、电融合技术等，其中电融合技术是效率很高的新型细胞融合技术。

(2)细胞杂交

①概念：基因型不同的细胞间的融合。

②应用：细胞杂交中染色体简单丢失，利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)削减的对应关系可进行基因定位。

2.单克隆抗体的制备

(1)过程

(2)杂交瘤细胞的特点：无限增殖，产生单克隆抗体。

(3)单克隆抗体的优点：其识别抗原部位的专一性，比一般抗血清优越得多，缘由是一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物。

(4)单克隆抗体的应用：单抗可作为特异探针，探讨相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。

特殊提示单克隆抗体与血清抗体比较

项目

分泌细胞

特点

生产

单克隆抗体

杂交瘤细胞

特异性强、灵敏度高

产量高，易纯化分别

血清抗体

各B淋巴细胞

特异性差、灵敏度低

产量低，分别困难

例1单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培育基筛选出杂交瘤细胞。在这种培育基上不能存活增殖的细胞是()

①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞

A.①②③④ B.①③⑤

C.②④ D.①③

答案A

解析单克隆抗体的制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合时，有以下三种状况：未发生融合的细胞(B淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞)；自身融合的细胞(B淋巴细胞自身融合、小鼠骨髓瘤细胞自身融合)；骨髓瘤细胞与单个B淋巴细胞融合的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞是制备单克隆抗体必需的，因此要将其筛选出来。

例2(2024·衢州高二检测)如图为制备单克隆抗体的流程。请据图回答下列问题：

(1)诱导动物细胞融合的基本原理是________________________________________________。

(2)诱导动物细胞融合的方法和诱导植物原生质体融合的方法类似，两者常用的化学诱导剂是______________，两者的主要区分是可用______________________来诱导动物细胞融合。

(3)过程③要获得所须要的X细胞，至少须要通过2次筛选和克隆培育，其中第一次筛选的目的是获得____________。图中X细胞具有____________________________________的特点。

(4)从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞融合、________________等动物细胞工程技术。

答案(1)细胞膜的流淌性(2)聚乙二醇(PEG)灭活的仙台病毒(3)杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体(4)动物细胞培育

解析(1)诱导细胞融合的基本原理是细胞膜的流淌性。

(2)诱导动物细胞融合的方法和诱导植物原生质体融合的方法类似，两者常用的化学诱导剂是聚乙二醇，两者的主要区分是可用灭活的仙台病毒来诱导动物细胞融合。

(3)融合后的细胞经过筛选才能获得所须要的目的细胞：第一次筛选是在选择培育基上培育，非杂交瘤细胞和未融合的细胞不能在此培育基上生长，杂交瘤细胞能在此培育基上生长。杂交瘤细胞具有既能无限增殖，又能产生特异性抗体的特点。

(4)从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞融合、动物细胞培育等动物细胞工程技术。

归纳总结有关细胞融合与制备单克隆抗体的5个关键点

(1)细胞融合完成的标记：细胞核融合成一个核。

(2)杂交瘤细胞的特点：兼有两个亲本细胞的特性，即在体外培育条件下能不断增殖，同时能产生具有某种特异性的抗体。

(3)获得单克隆抗体的场所：若在培育基中进行杂交瘤细胞培育，则从培育液中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培育，则从腹水中提取。

(4)制备单克隆抗体的过程中两次筛选的目的不同。

①第一次筛选：由于细胞融合是随机的，因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现，因此必需从中筛选出既能分泌抗体同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。

②其次次筛选：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。

(5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞诱导融合后不只产生一种细胞。融合后可能存在五种细胞，即未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B—B融合细胞、瘤—瘤融合细胞、B—瘤融合细胞。

二、动物的克隆繁殖

1.不同的动物细胞及全能性的表现程度

(1)受精卵：具有使后代细胞形成完