植物细胞工程的基本技术 .ppt

突变体的利用利用组织培养时，分裂状态的细胞易受培养条件和外界压力（如射线，化学物质等）的影响而产生突变的原理，诱导并筛选出对人类有用的突变体。第41页,共41页，星期六，2024年，5月4、差异（试比较生殖细胞、受精卵、体细胞的全能性）（1）受精卵的全能性﹥生殖细胞﹥体细胞(未分化细胞)一、细胞的全能性（2）植物细胞＞动物细胞（3）分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞第9页,共41页，星期六，2024年，5月怎样才能由一块组织通过培养得到一株完整植株,应该如何操作?请同学们阅读P34实验完成P35讨论题。第10页,共41页，星期六，2024年，5月超净工作台接种箱第11页,共41页，星期六，2024年，5月高压蒸汽灭菌锅－湿热灭菌第12页,共41页，星期六，2024年，5月酒精灯－干热灭菌第13页,共41页，星期六，2024年，5月接种工具第14页,共41页，星期六，2024年，5月灭菌是用物理或化学的方法来杀死或除去物品上或环境中的所有微生物。消毒是用物理或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物。消毒实际上是部分灭菌。灭菌与消毒植物组织培养操作中需要灭菌或消毒的物品有：灭菌：消毒：锥形瓶、培养基、烧杯、培养皿、解剖刀、镊子工作台、手、外植体、培养皿(瓷砖)第15页,共41页，星期六，2024年，5月实验胡萝卜的组织培养技术原理：植物根、茎、叶一般都具有全能性，在一定的营养和激素等条件下，可以形成,将愈伤组织转接到含有不同激素成分的培养基上，就可以诱导其生成胚状体或丛芽，进而发育成完整的小植株。证明：分化的植物细胞，仍具有形成完整植株所需要的。愈伤组织再分化全部基因脱分化第16页,共41页，星期六，2024年，5月切取形成层无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成培养室移栽脱分化再分化第17页,共41页，星期六，2024年，5月离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体外植体脱分化（去分化）植物激素：细胞分裂素、生长素再分化2、过程离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。无叶绿体,不进行光合作用第18页,共41页，星期六，2024年，5月(1)在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？防止杂菌污染，因为杂菌生长快，会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质，导致培养物迅速死亡。(2)在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花），是否也能培养成小植株？能。可以培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。第19页,共41页，星期六，2024年，5月1、概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。2、理论基础：植物细胞的全能性3、过程：外植体愈伤组织根、芽植物体二、植物组织培养技术再分化脱分化也叫：外植体如：茎尖、根尖适宜的温度、PH值、养料、激素、充足氧气条件第20页,共41页，星期六，2024年，5月5、脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。条件：①适宜温度、避光、pH和无菌环境。②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等）6、再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。（需光）具分裂、分化能力结果无细胞分裂、分化能力第21页,共41页，星期六，2024年，5月三、植物体细胞杂交技术不能存在生殖隔离尝试用这两种植物的体细胞进行杂交这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？第22页,共41页，星期六，2024年，5月1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？请思考：去细胞壁酶解法2．有没有一种温和的去壁方法呢？第23页,共41页，星期六，2024年，5月原生质体番茄细胞原生质体融合再生出细胞壁杂种细