无菌检查与微生物限度检查.ppt

实验室根据黑曲霉菌特性和自身实际，制定一套合理的解决方案。山东省药品检验所第29页,共38页，星期六，2024年，5月微生物限度检查方法选择的原则供试液制备方法、抑菌成分的消除方法及细菌、霉菌及酵母菌计数方法应尽量选择微生物限度检查法中操作简便、快速的方法，且应避免损伤供试品中污染的微生物。对于抑菌作用较强的供试品，在供试品溶液性状允许的情况下，应尽量选用薄膜过滤法进行试验。山东省药品检验所第30页,共38页，星期六，2024年，5月计数方法验证过程中供试品稀释级选择问题没有适宜的方法消除供试品中的抑菌作用而导致微生物回收的失败，可采用能使微生物生长的更高稀释级供试液进行方法验证试验。低稀释剂菌落计数过多，影响方法验证的结果计算，可采用适于方法验证的稀释级供试液进行方法验证试验。此时更高稀释级供试液的确认要从低往高的稀释级进行，但最高稀释级供试液选择应根据供试品应符合的微生物限度标准和菌数报告规则，如供试品应符合的微生物限度标准是1克细菌数不得过1000cfu，那么最高稀释级是1：10-3。山东省药品检验所第31页,共38页，星期六，2024年，5月计数方法验证的相关问题何种情况下，可选择更高一级的供试品稀释液进行方法验证和检验？山东省药品检验所第32页,共38页，星期六，2024年，5月供试品采用常规方法检验菌落计数结果不符合规定，是否还要进行方法验证试验？计数方法验证时，如不能寻找到各验证用菌回收率均能达到要求的有效方法时，该如何进行检查？山东省药品检验所第33页,共38页，星期六，2024年，5月控制菌检查新版药典增加了“控制菌检查用培养基的适用性检查”检验项目包括促生长能力、抑制能力及指示能力的检查删除“控制菌验证时的阴性菌对照组”控制菌判断：由“应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的生化试验”修订为“应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的鉴定试验”大肠菌群检查用培养基：由胆盐乳糖发酵培养基修订为乳糖胆盐发酵培养基。山东省药品检验所第34页,共38页，星期六，2024年，5月控制菌检查梭菌检查法：增菌培养基、培养时间、结果判断均做了修订。控制菌检查中增加了白色念珠菌检查：阴道、尿道用药增加了白色念珠菌检查。山东省药品检验所第35页,共38页，星期六，2024年，5月眼用制剂眼用制剂微生物限度检查修订为无菌检查由于眼用制剂剂型多、基质复杂，进行无菌检查则大大增加了检品的取样量，特别对于乳状液、乳膏剂、凝胶剂等等抗生素类眼用制剂，采用薄膜过滤法时如何通过滤膜，并有效削除抑菌作用将成为未来无菌检查的一个难点。山东省药品检验所第36页,共38页，星期六，2024年，5月抑菌效力检查法指导原则抑菌效力试验应包含3个基本方面：“所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低有效量。”“在药物研发阶段，均应确认其抗菌效力”“应验证最终容器中的抑菌剂效力在效期内不因贮藏条件而降低。”山东省药品检验所第37页,共38页，星期六，2024年，5月试验步骤设计实验方案筛选抑菌剂确定样品中合适的加入量计数方法的验证制备菌液向供试品中接种挑战微生物分别在不同时间对供试品中微生物计数分析实验数据结果判断山东省药品检验所第38页,共38页，星期六，2024年，5月**例如：阳性实验室和阳性培养室混用，实验人员频繁进出阳性操作间观察培养物，实验室压力和空气流的变化势必影响生物安全柜的运行，导致潜在污染的发生。**经过了多次修改，这是我们目前使用中的微生物实验室**日本双时代，选择非嗜热芽孢杆菌作为灭菌条件验证用菌，次菌来源于生产环节的长期监控，相对最常见最耐热的菌种**（其中，1.3还是比较明确的，比如说与实验平行的沉降菌测定超标，试验后环境监控指标不符合规定等等，或回忆起操作中出现了明显的疏漏，误使用了非灭菌器材等等，但对于（3）则需要实验室长期的积累和扎实的功底。环境菌库的建立