南充职业技术学院农业科学技术系.ppt

（五）家禽精液稀释1、稀释液的配制目的：增加输精母禽数，提高繁殖效率。常用稀释液：P255表8-32、稀释精液时的注意事项（1）精子应无污染、透明液少的新鲜精液。（2）稀释前要检查精液品质。（3）等温条件下进行，稀释液的渗透压与酸碱度与精液相同。（4）精液沿壁缓慢加入稀释液，防止气泡产生。（5）改变PH值，在2—5℃保存24h再受精。?精液稀释后即可进行保存。通过保存，可延长精子在体外的存活时间，便于使用和运输。现行的精液保存方式有3种，即1、常温(15—25℃)保存2、低温(0－5℃)保存3、冷冻(—79—196℃)保存。液态保存固态保存三精液保存常温保存的温度在15－25℃之间，温度允许有一定变动，所以又称为变温保存或室温保存。常温保存所需设备简单，特别适合猪的精液。（1）原理常温保存是通过增加酸度，降低精液的pH来抑制精子的代谢活动，以减少其能量消耗。酸性在一定范围内是可逆抑制，通常把pH调整到6.35左右。?1、精液常温保存向稀释液中加入有机酸，如己酸稀释液(CME)。C利用精子本身在代谢中产酸，自行调节pH，如康奈尔大学稀释液(CUE)。B常温保存的稀释液除降低pH使精于代谢减慢外，还依靠给精子补充足够的养分，同时加入抗菌物质以抑制细菌的孳生。D向稀释液中充入二氧化碳，如伊利尼变温稀释(1VT)。A有的还在稀释液中加入缓冲物质；有的加入明胶以阻止精子运动。E（2）方法（3）稀释液稀释液除能降低PH，使精子代谢减慢外，还能给精子补充足够的养分，同时加入抗菌物质抑制细菌生长和繁殖。另外加入明胶缓冲物质，阻碍精子运动。（1）原理低温保存主要是向稀释液中添加抗冷物质，防止精子发生冷休克。在体温状态下，精子的代谢正常，当温度降低时，精子的代谢活动减慢，当温度降至0—5℃，精于的代谢较弱，几乎处于休眠状态。此时精子的物质代谢和能量代谢均降到较低水平，废物累积减少，且此温下不利微生物的繁殖，故可达到保存目的。01（2）稀释液在马、绵羊的精液保存中应用，参见P186表5—5。02?2、精液低温保存（3）方法精液进行低温保存时，应采取逐步降温的方法，并使用含卵黄的稀释液，以防冷休克。首先把稀释后的精液，按着一个输精量(羊10—20个输精量)，分装到一个试管中，封口，再包以数层棉花或纱布，最外层用塑料袋扎紧，防止水分渗入。把包装好的精液放到0－5℃的低温环境中，经1—2h，精液即降至0—5℃。泡沫盒保存精液?注意事项：在保存过程中，要维持温度的恒定，防止升温。如特殊情况或运输可用广口保温瓶进行，在保温瓶中加7—8成满的冰块，把包装好的精液放在冰块上盖好，注意定期添加冰块。如无冰源，可采用化学制冷法，在冷水中加入一定量的氯化铵或尿素，可使水温达2－4℃。精液冷冻保存是利用液氮(－196℃)或干冰(－79℃)作冷源，将精液处理后冷冻起来，达到长期保存的目的。精液冷冻保存是人工授精工作的一大进步，由于保存时间的延长，使精液的使用不受地区的限制，从而加快了家畜品种的育成和改良速度。（1）精液冷冻保存的原理：利用超低温使精液和精子快速冷冻，快速越过形成冰晶的温度范围（0-60℃）、精液或精子中的水分不形成冰晶，而是形成玻璃化。同时在抗冻剂的存在下使精子免受冻伤，在温度上升至体温精液解冻后精子能够保持完整的形态结构、功能和受精能力。010302?3、精液冷冻保存液态→固态结晶态：缓慢降温形成。水分子有序形成冰晶对精子有害：机械和渗透压损伤。玻璃态：快速降温形成。水分子无序形成玻璃样的超微粒结晶，对精子无害。（0～-60℃）（-15～-25℃）01?玻璃化是可逆的，不稳定的，当缓慢升温时又可能形成冰晶化。（-60～-250℃）02?冷冻时细胞的损伤?冷冻时细胞的损伤冰晶：在0～-60℃低温区，缓慢降温条件下形成的，降温越慢，冰晶越大，-15～-25℃对精子危害最大。冰晶的形成对精子造成的机械损伤和渗透压损伤是引起精子死亡的主要物理因素。玻璃化：在-60～-250℃超低温区，从冰晶化区域内开始，就快速降温，迅速越过冰晶化进入玻璃化阶段，此阶段对精子无害。?添加冷冻保护剂（甘油，二甲基亚砜等）作用：增强精子抗冻能力，并对防止冰晶发生起到重要作用。壹（2）精液冷冻技术肆精液稀释：根据冻精的种类、分装剂型和稀释倍数的不同，精液的稀释方法也不尽一致，现生产中多采用一次或两次稀释法：叁采精及精液品质检查：精液冷冻效果与精液品质密切相关。做好采精的准备和操作，争取获得优质的精液。贰牛的精液冷冻已普及，现以牛精液冷冻为例，将精液冷冻制作技术叙述