分子发光分析法.ppt

4.取代基效应化学化工学院分析化学教研室1）给电子取代剂加强荧光—HN2，—NHR，—NR2，—OH，—OR，—CN产生p→π共轭二苯甲酮：弱荧光、强磷光S1→T1的系间窜跃产率接近1化合物苯苯酚苯胺苯基氰苯甲醚λemmax(nm)278~310285~365310~405280~390285~345相对荧光强度10182020202）得电子取代基减弱荧光、加强磷光—C=0，—COOH，—NO2不产生p→π共轭硝基苯：不产生荧光、弱磷光3）取代基的位置化学化工学院分析化学教研室空间位阻对荧光发射的影响反式二苯乙烯强荧光物质?F=0.75?F=0.03立体异构体对荧光发射的影响顺式二苯乙烯非荧光物质电离效应对荧光发射的影响OH-H+OH-H+pH=1,有荧光pH=13,无荧光无荧光有荧光化学化工学院分析化学教研室含有重原子的溶剂，由于重原子效应荧光减弱、磷光增强。5.重原子取代基效应—Cl，—Br，—IS1→T1的系间窜跃由于重原子的存在增强化合物萘1-甲基萘1-氟萘1-氯萘1-溴萘1-碘萘λFmax(nm)315318316319320~λPmax(nm)470476473483484488?P/?F0.0930.0530.0685.26.41000τp(s)2.62.51.40.230.0140.0023化学化工学院分析化学教研室6、环境因素对荧光的影响：（1）溶剂的极性：电子激发态比基态的极性大，溶剂的极性增强，荧光强度增大，荧光波长红移。溶剂相对介电常数荧光峰l/nm荧光效率乙腈38.84100.064丙酮21.54050.055氯仿5.23980.041四氯化碳2.243900.002巯基喹啉在不同溶剂中的荧光峰和荧光效率化学化工学院分析化学教研室（2）温度：温度升高，Kf不变，但非辐射跃迁的速率常数增大，是故荧光效率降低。（3）pH值：含酸性或碱性取代基的化合物荧光性质受pH的影响。如：无荧光蓝色荧光再如：化学化工学院分析化学教研室无荧光蓝色荧光化学化工学院分析化学教研室表面活性剂：有利于荧光发射。O2的存在：O2为顺磁性分子，溶液中溶解氧的存在，常常导致荧光降低，甚至熄灭，这可能是处于单重激发态的荧光物质的分子相互作用，加速系间窜跃（几率增大）所致。六.分子荧光(磷光)强度与荧光物质浓度的关系化学化工学院分析化学教研室1.荧光强度(磷光)与浓度的关系光吸收定律（Lambert–BeerLaw）相应的吸光分数为：荧光强度（IF）与相应的吸光分数成正比：按照级数展开式：化学化工学院分析化学教研室对于稀溶液，当?bc0.05（磷光?bc0.01）时：IF----荧光强度?F-----荧光量子产率k--与仪器灵敏度有关的参数I0--入射光强度。IP----磷光强度?P-----磷光量子产率b--吸收光程?--摩尔吸光系数C--荧光物质浓度化学化工学院分析化学教研室01但在高浓度时，If＝KC不成立02If03C04原因：高次项自熄灭现象，自吸收现象05七、荧光光谱仪化学化工学院分析化学教研室（一）.主要组成及部件的功能荧光分光光度计工作原理基及仪器结构框图光源氙灯激发单色器样品池光电倍增管数据处理仪器控制光源样品池激发单色器检测器数据处理仪器控制发射单色器发射单色器问题：荧光分光光度计与紫外-可见分光光度计有何异同点？化学化工学院分析化学教研室（二）.光源1.光源的要求：发射强度足够且稳定的连续光谱光辐射强度随波长的变化小有足够长的使用寿命2.氙灯光源常用气体放电灯类型：氙灯光源高压汞光源波长范围：200~1000nm工作压力：5~20atm启动电压：20~40KV使用寿命：1000~2000h最广泛应用的连续光源：发射波长范围宽发射光强度大3.高压汞灯光源化学化工学院分析化学教研室应用广泛的线光源：253.7296.5302.2312.6313.2365.0365.5366.3404.7435.8546.1557.0579.0(nm)光源样品池激发滤光片检测器数据处理仪器控制发射单色器光源样品池激