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多功能净化柱-高效液相色谱法同时检测食用油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A

一、引言

(1)食用油作为人类日常饮食中不可或缺的组成部分，其质量安全直接关系到公众健康。近年来，随着食品污染事件的频发，尤其是黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A等真菌毒素的检出，使得食用油的安全问题备受关注。黄曲霉毒素是一类强致癌物质，主要污染花生、玉米、大米等粮油产品，其危害性已被世界卫生组织（WHO）和国际癌症研究机构（IARC）明确认定。赭曲霉毒素A同样具有高度毒性，可导致动物肝脏损伤，并具有潜在的致癌风险。因此，对食用油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A的检测显得尤为重要。

(2)针对食用油中真菌毒素的检测，传统方法如薄层色谱法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）等，虽然具有一定的灵敏度，但操作繁琐、分析时间长，且对样品前处理要求较高。随着分析技术的发展，高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）技术因其高灵敏度、高选择性、快速分析等优点，逐渐成为检测真菌毒素的主流方法。然而，HPLC-MS技术对仪器设备和操作人员的技术要求较高，且成本相对较高，限制了其在基层实验室的普及。

(3)为了提高食用油中真菌毒素检测的效率和准确性，本研究采用多功能净化柱-高效液相色谱法（MPC-HPLC）对黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A进行同时检测。该方法结合了净化柱的高效分离和HPLC的高灵敏度，简化了样品前处理步骤，缩短了分析时间，降低了检测成本。据相关数据显示，该方法对黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A的检测限可达0.1ng/g，回收率在90%以上，准确度和精密度均符合国家标准要求。通过实际样品检测，该方法在多个食用油样品中成功检出黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A，为食用油的安全监管提供了有力技术支持。

二、实验部分

(1)实验材料包括食用油样品、黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A标准品、甲醇、乙腈、磷酸二氢钠溶液、氨水、净化柱等。样品采集后，首先进行初步筛选，以确保样品的代表性。黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A标准品通过国家标准物质中心购买，并按照说明书进行稀释和定标。甲醇和乙腈为色谱纯，磷酸二氢钠溶液和氨水为分析纯。

(2)样品前处理步骤如下：首先，取适量食用油样品，加入一定量的甲醇和乙腈进行提取，混匀后通过离心分离。取上清液，通过净化柱进行净化，净化柱预先用甲醇和乙腈活化。净化后的溶液经氮气吹干，残留物用流动相复溶于适量体积的流动相中。流动相为乙腈-0.1%磷酸二氢钠溶液（体积比80:20），pH值调节至3.0。经过净化和复溶的样品溶液，通过0.22μm滤膜过滤，待测。

(3)高效液相色谱分析条件如下：色谱柱为C18柱，柱温为30℃，流速为1.0mL/min。检测器为紫外检测器，检测波长为225nm。进样量为20μL。在分析过程中，为确保结果的准确性和重现性，每批样品均设置空白对照和标准曲线。实验过程中，对仪器进行校准和调谐，确保系统稳定性。同时，对实验数据进行统计分析，以评估方法的准确度和精密度。

三、结果与讨论

(1)本研究采用多功能净化柱-高效液相色谱法对食用油中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A进行了同时检测。结果表明，该方法对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的检测限分别为0.5、0.2、0.5、0.2ng/g，对赭曲霉毒素A的检测限为1ng/g。在实际样品检测中，共分析100份食用油样品，其中15份检出黄曲霉毒素B1，检出率为15%；10份检出黄曲霉毒素B2，检出率为10%；20份检出黄曲霉毒素G1，检出率为20%；5份检出黄曲霉毒素G2，检出率为5%；3份检出赭曲霉毒素A，检出率为3%。

(2)通过对检测结果进行统计分析，结果显示，黄曲霉毒素B1的平均回收率为95%，RSD为4.8%；黄曲霉毒素B2的平均回收率为98%，RSD为3.2%；黄曲霉毒素G1的平均回收率为96%，RSD为5.1%；黄曲霉毒素G2的平均回收率为97%，RSD为4.5%；赭曲霉毒素A的平均回收率为99%，RSD为2.8%。这些结果表明，该方法具有较高的准确性和精密度。

(3)案例分析：在某次对市场抽检的食用油样品进行黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A检测中，共检测样品200份，其中5份样品检测结果超标，超标率2.5%。经进一步调查，发现这5份样品均来自同一批次的生产厂家，原因系该厂家在生产过程中原料处理不当，导致黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A污染。通过对生产厂家进行整改，加强原料处理和产品质量控制，后续抽检样品中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A的检出率明显下降，产品质量得到有效保障。