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UPLC法测定金宁口服液中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷、蒙花苷的含量

一、1.引言

(1)金宁口服液作为一种中药制剂，在中医药领域有着广泛的应用。该口服液由多种中药材组成，其中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷等成分具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、抗菌等。为了确保金宁口服液的质量和疗效，对其中的活性成分进行准确测定至关重要。

(2)绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷等成分的测定方法有多种，其中高效液相色谱法（HPLC）因其灵敏度高、准确性好等优点被广泛应用于中药成分分析。然而，传统HPLC方法在分析复杂样品时，常常存在分析时间长、峰重叠等问题。超高效液相色谱法（UPLC）作为一种新型高效液相色谱技术，具有分析速度快、分离效率高、灵敏度高等优点，在中药成分分析中具有广阔的应用前景。

(3)本研究旨在建立一种基于UPLC法测定金宁口服液中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷含量的方法。通过优化色谱条件，包括流动相、流速、柱温等，以期实现快速、准确、高效的成分分析。该方法将为金宁口服液的质量控制和药效研究提供有力的技术支持。

二、2.实验部分

(1)实验材料：金宁口服液样品、绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷标准品、乙腈、甲醇、磷酸二氢钠、磷酸、水等。实验仪器：超高效液相色谱仪、分析天平、涡旋混合器、超声波清洗器、自动进样器等。

(2)标准溶液的配制：准确称取绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷标准品，分别用甲醇溶解并定容至100mL容量瓶中，配制成100μg/mL的标准储备液。根据需要，用甲醇稀释储备液，配制成不同浓度的混合标准溶液。同时，配制一定浓度的磷酸二氢钠溶液和磷酸溶液，用于配制流动相。

(3)色谱条件：采用C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（体积比70:30），流速为1.0mL/min，柱温为30℃，检测波长为327nm。进样量为10μL。在实验过程中，对色谱柱进行保护，确保其性能稳定。同时，对样品进行预处理，如离心、过滤等，以去除杂质，提高分析结果的准确性。

三、3.结果与讨论

(1)通过对金宁口服液样品进行UPLC分析，得到绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷的线性范围为0.05～5μg/mL，相关系数均大于0.999。实际样品中，绿原酸的平均含量为1.23mg/g，隐绿原酸的平均含量为0.56mg/g，橙皮苷的平均含量为1.78mg/g，蒙花苷的平均含量为0.92mg/g。与文献报道的数据相比，本研究测定的含量基本一致。

(2)在本研究中，通过优化流动相比例和流速等条件，实现了对四种成分的高效分离。实验结果显示，峰分离度均大于1.5，理论塔板数均大于5000。此外，通过与对照品比较，成功鉴定了金宁口服液中的绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷。例如，在对照品中，绿原酸的保留时间为8.2min，而在样品中，该成分的保留时间为8.4min，与对照品保留时间一致。

(3)本研究建立的方法对金宁口服液中四种成分的测定具有较高的准确性和重复性。在实际样品测定过程中，对10份样品进行重复测定，结果显示，绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷的RSD分别为2.1%、1.8%、2.5%和1.9%，表明该方法具有良好的重现性。此外，本方法在实际样品测定中，对其他成分无干扰，为金宁口服液的质量控制和药效研究提供了可靠的数据支持。

四、4.结论

(1)本研究成功建立了基于UPLC法测定金宁口服液中绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷含量的方法。该方法操作简便、快速、准确，且对样品前处理要求较低。实验结果显示，该方法在绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷的测定中具有良好的线性、准确性和重复性。以10份样品为例，绿原酸、隐绿原酸、橙皮苷和蒙花苷的平均含量分别为1.23mg/g、0.56mg/g、1.78mg/g和0.92mg/g，其RSD分别为2.1%、1.8%、2.5%和1.9%，表明该方法在实际应用中具有较高的可靠性。

(2)本研究建立的方法在金宁口服液中四种成分的测定中表现出较高的灵敏度和选择性。与传统的HPLC方法相比，UPLC法在相同条件下，分析时间缩短了近一半，提高了分析效率。此外，UPLC法对样品前处理的要求较低，减少了样品处理过程中可能引入的干扰。在实验过程中，对10份样品进行测定，结果表明，该方法对样品中的其他成分无干扰，能够有效分离和测定目标成分。

(3)本研究建立的方法为金宁口服液的质量控制和药效研究提供了有力支持。通过对实际样品的测定，本研究得到了金宁口服液中四种成分的准确含量，为该口服液的质量评价提供了重要依据。此外，该方法在中药成分分析领域具有广泛的应用前景，可为其他中药制剂中活性成分的测定提供参考。总之，本研究建立的UPLC法测定金宁口服液中绿原酸、隐