一骨形成标志物检验骨钙素三I型胶原前肽二骨性碱性磷酸酶骨疾病的生物化学检验讲解.ppt

（三）抗酒石酸酸性磷酸酶骨吸收期间，破骨细胞产生和分泌一种耐酒石酸酸性磷酸酶进入破骨细胞与骨细胞表面之间的间隙，并能在血清中测得，能反映破骨细胞活性和骨吸收情况。由破骨细胞产生和分泌的。当骨吸收时，TRAP释放入血液循环，故认为血浆中TRAP水平是一项评价骨吸收的生化指标，主要反映破骨细胞活性和骨吸收状态【检测方法】1.酶动力学法2.酶联免疫法【参考区间】酶动力学法：成人血浆3.1～5.4U/L酶联免疫法：男性22～54U/L女性（绝经前）22～54U/L健康老人55～79U/L【临床意义】1.增高见于原发性甲状旁腺功能亢进、慢性肾功能不全、Paget病、骨转移癌、卵巢切除术后、高转换型骨质疏松症2.降低见于骨吸收降低的疾病，如甲状旁腺功能降低(四)尿羟脯氨酸HOP主要存在于胶原，由脯氨酸羟化而成。大约10%的羟脯氨酸在胶原分解时被释放从尿排出。由于受各种疾病或其他因素包括饮食的干扰，并且人体其他组织包括肌肉和皮肤也含有一定比例的胶原，所以尿羟脯氨酸对骨更新或骨吸收不特异。尿HOP排出量可以反映骨吸收和骨转换程度，但受饮食影响较大，特异性差，收集24小时尿之前，应素食2～3天【检测方法】氯胺T化学法：尿中与肽结合的羟脯氨酸，经酸水解后释出。用氯胺T(N-氯-对甲基苯磺酰胺钠)将羟脯氨酸氧化，使其形成含吡咯环的氧化物。再用过氯酸破坏多余的氯胺T，终止氧化过程。同时，使氧化物与对二甲氨基苯甲醛反应，生成红色化合物进行比色定量。【参考区间】清晨第二次空腹晨尿，尿羟脯氨酸与肌酐的比值(HOP/Cr)的参考区间：0.06～0.01624小时尿HOP测定的参考区间：114～300μmol/24h【临床意义】1.增高见于儿童生长期、甲状旁腺功能亢进、甲状腺功能亢进、骨转移癌、慢性肾功能不全、Paget病、佝偻病和骨软化症、高转换型骨质疏松症、绝经后骨质疏松症等，严重骨折患者尿HOP也可增加2.降低见于甲状腺功能低下、侏儒症等四、骨代谢调节激素的测定(―)甲状旁腺激素测定（二）活性维生素D测定(三)降钙素测定一、骨形成标志物检验(―)骨钙素(三)I型胶原前肽(二)骨性碱性磷酸酶骨疾病的生物化学检验(―)骨钙素测定骨钙素BGP是人骨中主要的和最多的非胶原蛋白。骨钙素在1.25-(OH)2-D3刺激下由成骨细胞合成。主要生理功能是抑制异常的羟基磷灰石结晶的形成，维持骨的正常矿化速率。骨钙素释放入血循环后，被肾迅速地清除，循环中的骨钙素半寿期仅为5分钟左右，故血清骨钙素水平基本上能够反映近期骨细胞合成骨钙素和骨形成的情况，是反映骨代谢状态的一项特异、灵敏的生化指标。【检测方法】主要有放射免疫法（RIA法）、酶联免疫法（ELISA法）、亲和素-生物素酶免疫测定法(BAEIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、免疫荧光分析法(FIA)等。1.放射免疫法用125I标记骨钙素和未标记的骨钙素对限量的特异性抗体竞争结合反应。2.化学发光免疫分析法采用双抗体夹心法原理。【参考区间】放射免疫法：成人4.75±1.33μg/L化学发光免疫分析法：成年男性：14.0～70.0μg/L女性：绝经前11.0～43.0μg/L绝经后15.0～46.0μg/L【临床意义】1.增高见于儿童生长期、肾性骨营养不良、Paget病、甲状旁腺功能亢进、甲状腺功能亢进、骨折、骨转移癌、低磷血症、肾功能不全等。2.降低见于甲状旁腺功能减退、甲状腺功能减退、肝病、长期应用肾上腺皮质激素治疗等。(二)骨性碱性磷酸酶碱性磷酸酶存在于骨、肝肠、肾和胎盘等许多组织。成骨细胞中ALP活性高，当成骨细胞活跃，可见血清B-ALP活性增高。故B-ALP活性可作为骨更新的指标。B-ALP在血清中比骨钙素更稳定，半寿期为1～2天，并且不受昼夜节律变化的影响，标本不需要特殊处理。因此血清B-ALP在反映成骨细胞活性和骨形成上则有较高特异性，优于骨钙素。【检测方法】先识别或分离出B-ALP，再测定其活性。近来建立了对B-ALP特异性很强的单克隆抗体免疫分析法，具有高度的特异性和敏感性，而且操作简便，是目前检测B-ALP的最佳方法。1.免疫活性测定法2.酶联免疫法【参考区间】免疫活性测定法：成年男性24.9±7.0U/L