产品说明书人降钙素原定量分析酶联免疫检测试剂盒（96T48T）.docx

酶联免疫检测试剂盒

第

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产品说明书

人降钙素原定量分析酶联免疫检测试剂盒（96T/48T）

产品内容:

产品编号

组分

规格（96T/48T）

MDSH2103-01

人降钙素原预包被板

12条/6条

MDSH2103-02

标准品稀释液

10ml/5ml

MDSH2103-03

人降钙素原标准品

2支/1支(冻干)*

MDSH2103-04

抗体HRP结合物

10ml/5ml

MDSH2103-05

浓缩洗涤液20×

30ml/15ml

MDSH2103-06

TMB底物

10ml/5ml

MDSH2103-07

中止液

5ml/3ml

MDSH2103-08

封板胶纸

3/2张

降钙素原简介：

降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7KD。PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺，肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酵切分解为(未成熟)降钙素，羧基端肽和氨基端肽。健康人血中仅含有少量的PCT.1.2.细胞感染后PCT会明显升高。动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT.3.脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基酸末端的Ala-Pro.4.PCT水平升高见于细胞性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克.5.6.7.8.9.10.。PCT可作为脓毒血症的预后指标8.11.12.13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标.14.15。对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效的判断的指标。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中降钙素原的浓度。降钙素原捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的降钙素原会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入辣根过氧化物酶标记的抗人降钙素原抗体后，抗人降钙素原抗体与降钙素原接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在降钙素原将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，降钙素原浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中降钙素原浓度。

保存条件：

试剂盒请保存在2～8℃。

注意事项:

浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。

标准品复溶加样后，剩余部份请丢弃。

底物请勿接触氧化剂和金属。

加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。

严禁混用不同批号的试剂盒组份。

充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。

室温反应，请严格控制在25～28℃。

洗涤过程是至关重要的，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。

试验中标准品和样本检测时建议作双复孔。

加样过程中避免气泡的产生。

标本收集:

标本的收集请按下列流程进行操作；

A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；

B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；

C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集；

D.若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。

血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；

标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。

请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。

注：人血清或血浆样本请用样本分析缓冲液做倍比稀释后再检测。

样本的稀释:

血清或血浆样本建议从2倍开始稀释

检测前准备工作:

试剂盒自冰箱中取出后应置室温（25～28℃）平衡20分钟；每次检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。

将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。

如有5X标准品稀释液，请按所需量用双蒸水或去离子水稀释(1份加4水)。

标准品:按标签复溶体积加入牛血清复溶使降钙素原终浓度达到4000pg/ml，室温反应，请严格控制在25～28℃，静置10~15分钟后轻轻混悬（建议抽吸几次）待彻底溶解，用标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。（标准曲线取七个点，最高浓度为4000pg/ml,标准品稀释液直接加入作为0浓度.）下图为标准品稀释示意图。

洗涤方法:

自动洗板机或人工洗板：每孔洗涤液为300ul，注入与吸出间隔15-30秒。洗板5次。最后一次洗板完成后将板倒扣着在厚吸水纸上用力拍干。