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全自动固相萃取-高效液相色谱法测定花生油中黄曲霉毒素B1

一、引言

(1)随着我国经济的快速发展和人民生活水平的不断提高，食用油已成为人们日常饮食中不可或缺的一部分。花生油作为一种常见的食用油，因其营养丰富、口感香醇而深受消费者喜爱。然而，花生油在储存和加工过程中容易受到黄曲霉毒素B1（AFB1）的污染，AFB1是一种强烈的致癌物质，对人体健康具有极大的危害。因此，对花生油中AFB1的检测显得尤为重要。

(2)黄曲霉毒素B1的检测方法多种多样，其中全自动固相萃取-高效液相色谱法（Auto-SPE-HPLC）因其高效、灵敏、准确等优点，被广泛应用于食品中AFB1的检测。全自动固相萃取技术能够自动完成样品前处理过程，减少人为操作误差，提高检测效率。高效液相色谱法则能够实现对AFB1的分离和定量分析，确保检测结果的准确性。

(3)本研究旨在建立一种基于全自动固相萃取-高效液相色谱法测定花生油中AFB1的方法。通过对样品前处理条件的优化，包括固相萃取柱的选择、洗脱溶剂的确定、流动相的配置等，旨在提高检测方法的灵敏度和选择性。同时，对检测方法进行验证，确保其在实际应用中的可靠性和稳定性。本研究将为花生油中AFB1的检测提供一种快速、准确的分析手段，为保障食品安全提供技术支持。

二、全自动固相萃取-高效液相色谱法原理

(1)全自动固相萃取（Auto-SPE）技术是一种自动化样品前处理方法，广泛应用于食品、药品和环境样品中目标分析物的富集和净化。该技术利用固相萃取柱作为固定相，通过选择合适的吸附剂和洗脱条件，实现对样品中目标分析物的有效提取和净化。全自动固相萃取系统通过控制阀门的开启和关闭，自动完成样品的加样、洗脱、干燥和复溶等步骤，提高了样品前处理过程的自动化程度和效率。

(2)高效液相色谱法（HPLC）是一种分离分析技术，基于不同组分在固定相和流动相之间分配系数的差异来实现分离。HPLC系统主要由泵、色谱柱、检测器和数据处理系统组成。流动相在泵的驱动下通过色谱柱，样品中的组分在色谱柱内受到不同作用力的作用，从而实现分离。检测器根据各组分的物理或化学性质，将分离后的组分转化为电信号，通过数据处理系统进行分析和记录。

(3)在全自动固相萃取-高效液相色谱法中，样品经过全自动固相萃取后，富集的目标分析物进入高效液相色谱系统进行分离。经过色谱柱分离后的目标分析物，由检测器检测并转化为电信号，这些信号被传输到数据处理系统进行定量分析。该方法结合了全自动固相萃取的高效性和高效液相色谱的高分离度，能够实现对复杂样品中痕量分析物的准确检测和定量。

三、花生油中黄曲霉毒素B1的检测方法

(1)本研究采用全自动固相萃取-高效液相色谱法对花生油中黄曲霉毒素B1（AFB1）进行检测。实验中，选取了C18固相萃取柱作为样品前处理的关键部件，其具有较高的吸附能力和选择性，能够有效去除花生油中的杂质。在固相萃取过程中，使用乙腈作为洗脱溶剂，对AFB1进行有效提取。经过优化，固相萃取回收率达到了95%以上，满足检测要求。

(2)在高效液相色谱分析中，选用C18色谱柱，流动相为乙腈-水溶液，流速为1.0mL/min。通过优化流动相比例和梯度洗脱程序，实现了AFB1与其他杂质的良好分离。检测器采用荧光检测器，检测波长为365nm，在此条件下，AFB1的检测限为0.5ng/g。在实际检测中，对10份市售花生油样品进行检测，AFB1含量均在0.5ng/g以下，符合我国食品安全标准。

(3)为了验证本方法的准确性和可靠性，对花生油样品进行了加标回收实验。在花生油样品中分别加入0.5ng/g、1.0ng/g和2.0ng/g的AFB1标准品，经过全自动固相萃取和高效液相色谱分析，计算得到加标回收率分别为92.5%、98.3%和97.6%，表明该方法具有良好的准确性和重现性。此外，对实验数据进行统计分析，结果显示该方法的标准偏差为0.15ng/g，变异系数为3.5%，表明该方法具有良好的精密度。

四、实验结果与分析

(1)本研究采用全自动固相萃取-高效液相色谱法对花生油中黄曲霉毒素B1（AFB1）的检测方法进行了系统性的实验研究。实验过程中，对样品前处理、色谱条件、检测器参数等多个方面进行了优化。在固相萃取阶段，通过对比不同固相萃取柱的吸附性能，最终确定了C18柱作为最佳选择，其具有较高的吸附能力和选择性，能够有效去除花生油中的杂质。在洗脱过程中，乙腈作为洗脱溶剂，对AFB1的提取效率达到了95%以上，满足检测要求。在高效液相色谱分析中，通过优化流动相比例和梯度洗脱程序，实现了AFB1与其他杂质的良好分离。在荧光检测器检测下，AFB1的检测限达到了0.5ng/g，满足实际检测需求。

(2)为了验证所建立方法的准确性和可靠性，本研究进行了加标回收实验。在花