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四,(2025松江一模)染料废水的生物处理(26分)
活性黑5是一种低毒性,难褪色的含氮染料。欲利用生物酶处理染料废水中的活性黑5,具体操作流程如图6。从染料废水堆积池的污泥中获得优势菌群,采用浓度梯度驯化法,进一步培养获得具备强分解活性黑5能力的假单胞杆菌,并进行基因表达分析。
图6
24.(2分)培养基I中,除了活性黑5以外,还需添加的成分是。(多选)
A.葡萄糖 B.抗生素 C.水 D.琼脂
25.(2分)培养基I从用途上属于。(编号选填)
①固体培养基 ②液体培养基 ③通用培养基
④选择培养基 ⑤鉴别培养基
26.(2分)将细菌从培养基I转移到培养基II的目的是。
27.(2分)浓度梯度驯化过程中,培养液中可能出现的变化有。(多选)
A.假单胞杆菌中BVU5蛋白的含量 B.假单胞杆菌对活性黑5的分解速率
C.假单胞杆菌的菌落数目 D.假单胞杆菌中BVU5蛋白的空间结构
28.(2分)假单胞杆菌中,BVU5蛋白分解活性黑5的场所最可能为_______。(单选)
A.拟核 B.细胞质基质 C.溶酶体 D.核糖体
29.(2分)据图6和所学知识推测,驯化后的假单胞杆菌增强了BVU5基因的_____。(多选)
A.复制 B.转录 C.翻译 D.逆转录
科研人员为了实现在大肠杆菌中大量表达外源BVU5蛋白,首先需要利用PCR技术获得BVU5编码基因。该基因编码链首尾处各20个核苷酸的序列及相关信息如图7。
图7
30.(2分)已知BVU5基因编码链总长为1098个核苷酸,据图7及所学知识分析该基因编码的BVU5蛋白的氨基酸数目为_______。(编号选填)
①365②366③1095④1098⑤3285⑥3294
31.(4分)若要在基因的前后位置,分别添加NcoI及SalI限制性内切核酸酶识别序列,并大量扩增出BVU5基因,则PCR实验中所需的引物序列为______________________________。(按5’→3’方向填空,引物长度应为26个核苷酸)
32.(3分)在利用基因工程表达BVU5蛋白的过程中,PCR实验后应进行的步骤依次是_______。(选择编号并排序)
①筛选和鉴定含BVU5基因的大肠杆菌 ②从细菌中提取DNA
③DNA连接酶拼接DNA片段 ④限制性内切核酸酶切割
⑤PCR产物的凝胶电泳鉴定 ⑥BVU5基因导入受体细胞
33.(2分)若想进一步改良BVU5蛋白,但其结构未知,欲通过蛋白质工程迅速获得BVU5蛋白突变株,应选用的策略是_______。(单选)
A.定点突变直接改变氨基酸序列 B.定点突变直接改变基因序列
C.随机突变直接改变氨基酸序列 D.随机突变直接改变基因序列
34.(3分)设计体外实验,验证BVU5蛋白催化反应需要还原型辅酶,而非氧化型辅酶的辅助。请选择正确的编号补充表3信息。(编号选填)
表3
组别
处理方式
实验结果(脱色率)
对照组
(1)_____
-
实验组1
(2)_____
-
实验组2
(3)_____
++++
注:“-”代表脱色率低,“+”代表脱色率高
①最适温度,pH ②适宜浓度的BVU5蛋白
③活性黑5溶液 ④生理盐水
⑤NADH或NADPH ⑥NAD+或NADP+
四,印染废水的生物处理(26分)
24.(2分)ACD25.(2分)④26.(2分)进一步分离纯化细菌
27.(2分)ABD28.(2分)B29.(2分)BC30.(2分)①
31.(4分)引物1:5’-CCATGGATGTCGAGCAACTTCCTCAA-3’
引物2:5’-GTCGACTTAGTAGTCGATGACCACGT-3’
32.(3分)⑤④③⑥①33.(2分)D34.(3分)①②③,①②③⑥,①②③⑤
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