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培养基的制备实验报告材料

（文章一）：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)

（一）、实验题目：培养基的制备与灭菌

（二）、实验目的：

（1）、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。

（2）、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。

（三）、实验器材：

（1）、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

（2）、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移

液管、试管架、铁针、量筒。

（四）、实验原理：

（1）、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。（2）

N源：包括无机氮和有机氮。（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢

化合物等。（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。微量元素：Cu、

K、Mg、S、P、Zn。有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、

某些氨基酸或核酸等。

（2）、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不

同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。培

养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养

基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础

培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立

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即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。

（3）、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢

子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅

套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，

导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min可以彻底灭

菌，本次实验灭菌20min。若是含糖培养基，110℃、30min。（2）

干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。因高温，所以含

水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。（3）紫外

灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。（4）过滤除菌：

实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。除病菌需更小。

（五）、实验步骤：

（1）、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、

1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶

解，移入三角瓶，并加入

1.5g琼脂。加上棉塞，迅速拔出能发出清脆声响即可，用报纸包住并

系好麻绳。

（2）、包移液管和培养皿（1）包一包培养皿（一包五个）：用手压

紧、塞好，折出棱角，包好后摇晃没有培养皿相互碰撞的声音即可。

（2）包2支移液管：用棉花塞好移液管尾部，露出1~2cm即可。取

长条报纸，一端折90°角，紧密严实沿30°角卷好移液管，尾部叠好

防止散开。

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（3）、高压蒸汽灭菌（1）灭菌前要先看水位是否合适。（2）将包

好的待灭菌物品放入内层锅，不要装得太挤，棉塞不应染上培养基。

（3）加盖，两两对称旋紧螺栓。（4）设定条件：0.1MPa、121℃、

20min，进行加热。（5）先打开排气阀，待空气排尽后，关上排气

阀。（6）结束后，自然降温，压力降为0后，打开排气阀取出物品。

（4）、干热灭菌（1）将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内，关好

门箱。（2）设定条件：160~170℃，恒温2h。（3）结