中医药研究常用分子生物学技术.ppt

米丽华生物教研室2272304教学参考资料唐炳华、王继峰:医学分子生物学(第一版）,中国中医药出版社,2006年胡维新:医学分子生物学（第一版）,科学出版社,2007年著，魏群等译：基因克隆和DNA分析（第五版），高等教育出版社，2003年王艳明、周坤福、徐力：分子生物学与中医药研究，上海中医药大学出版社，2000年RobertF.Weaver：MolecularBiology（3rded），McGraw-HillPress.2005[美]J.萨姆布鲁克D.W.拉塞尔著，黄培堂等译：分子克隆实验指南（第三版），科学出版社，2002年朱玉贤、李毅、郑晓峰：现代分子生物学（第三版），高等教育出版社，2007年01020304卢圣栋：现代分子生物学实验技术，高等教育出版社，1993年Lewin,B.,GENESⅧ.UniversityPress,Oxford.2004etalMolecularBiologyoftheGene5thTheBenjamin/CummingsPublishingCompany,Inc.2003孙乃恩孙东旭朱德煦：分子遗传学（第二版），南京大学出版社，1997年05网址：（参见教材P274表7-3）教学参考资料01广义上，分子生物学是从分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的一门生命学科。02狭义上，分子生物学是一门在分子水平上研究基因结构和功能的学科。03分子生物学源自遗传学和生物化学，它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象。分子生物学的含义第一章绪论第一章绪论一、什么是分子生物学分子生物学已广泛渗透到医学科学的各个领域，成为现代医学的理论基础。微生物学临床各学科细胞学免疫学病理学药理学生理学分子生物学0102分子生物学的主要研究内容分子生物学理论核酸的分子生物学：研究核酸的结构及其功能。分子遗传学（moleculargenetics）是其主要研究内容包括①核酸/基因组的结构，②遗传信息的复制，③转录与翻译，④核酸存储的信息突变与修复，⑤基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。遗传信息传递的中心法则（centraldogma）是其理论体系的核心。分子生物学的主要研究内容分子生物学理论：核酸的分子生物学：研究核酸的结构及其功能。研究执行各种生命功能的蛋白质的结构与功能。蛋白质的分子生物学信号转导机理的研究在理论和技术方面与上述核酸及蛋白质分子有着紧密的联系，是当前分子生物学发展最迅速的领域之一。细胞信号转导的分子生物学：研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。二、分子生物学的主要研究内容二、分子生物学的主要研究内容（二）?分子生物学技术1、基本技术分光光度技术；电泳技术（琼脂糖凝胶电泳，醋酸纤维素薄膜电泳，聚丙烯酰胺凝胶电泳，等电聚焦，λ噬菌体的限制性内切酶酶切片段）；放射性同位素技术；色谱技术（层析法，吸附色谱法，分配色谱法，离子交换色谱法，凝胶色谱法，亲和色谱法，高效液相色谱法）；细胞培养等（二）?分子生物学技术2、核酸操作技术核酸的提取和纯化；DNA、RNA合成技术；DNA重组技术；核酸杂交技术；DNA序列测定技术等。3、实用蛋白技术蛋白质的提取和纯化；蛋白质测定；蛋白质印迹技术；蛋白质质谱分析技术等。二、分子生物学的主要研究内容分子生物学中的两项最重要的实验技术分子生物学的诞生和发展中的瓶颈基因克隆（DNA重组，基因工程）(Geneclone,DNArecombination,geneengineering)基因转移载体的发现vectorDNA操作工具酶的发现DNAmanipulation基因合成和基因测序sequencePCR技术(polymerasechainreaction)分子生物学在医学中的应用如癌的分子生物学；免疫分子生物学；人类基因分析；基因产物的医学用途；新药的发现；基因诊断、治疗；人类疾病的分子生物学等。分子生物学的主要研究内容准备和酝酿阶段三、分子生物学的发展简史（一）准备和酝酿阶段19世纪后期到20世纪50年代初，是现代分子生物学诞生的准备和酝酿阶段。在这一阶段产生了两点对生命本质的认识上的重大突破：1、确定了蛋白质是生命的主要基础物质2、确定了生