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丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制.ppt

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丙二酸对琥珀酸的竞争性抑制主讲人:葛静制作人:胡波实验目的实验原理实验材料与仪器实验步骤实验结果记录注意事项实验讨论实验目的:A学习和掌握竞争性抑制作用的特点。B观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用。实验原理化学结构与酶作用的底物结构相似的物质,可与底物竞争结合酶的活性中心,使酶的活性降低甚至丧失,这种抑制作用称为竞争性抑制作用。E+SESE+P+IEI+SEIS+I琥珀酸脱氢酶:是机体内参与三羧酸循环的一种重要的脱氢酶,其辅基为FAD,如心肌中的琥珀酸脱氢酶在缺氧的情况下,可使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢可将蓝色的甲烯蓝还原成无色的甲烯白。这样,便可以显示琥珀酸脱氢酶的作用实验材料与仪器:器材:大白鼠、手术剪、滴管镊子、纱布、漏斗、量筒、烧杯、研钵刻度吸量管试管及试管架、恒温水箱、试剂:0.2mol/L琥珀酸溶液、0.02mol/L琥珀酸溶液0.2mol/L丙二酸溶液0.02mol/L丙二酸溶液、1/15mol/LPH=7.4磷酸盐缓冲液、0.02%甲烯蓝酶提取液的制备:取大白鼠的骨骼肌,用冷水洗3次,加入1/15mol/L磷酸缓冲液pH在7.4。在研钵中碾碎,然后用纱布过滤,用干净的烧杯收集过滤的备用。实验步骤:取试管6支,编号,在按图步骤操作酶提取液(ml)磷酸缓冲液(ml)0.2mol/L琥珀酸(滴)0.02mol/L琥珀酸(滴)0.2mol/L丙二酸溶液(滴)0.02mol/L丙二酸溶液(滴)蒸馏水(滴)甲烯蓝(滴)褪色时间(分钟)试管12—8———83试管22—8——8—3试管32—8—8——3试管42——88——3试管5—28———83试管62—8———83试管6:酶提取液在100℃水浴中保温各管溶液立即混均匀,沿试管壁加入液01体石蜡,约0.5cm,各管置于37℃的水02浴中保温,切勿摇动试管,随时03观察比较各试管颜色的变化,04记录褪色时间。05实验结果记录:褪色时间(分钟)[I]/[S]试管1试管2试管3试管4试管5试管6

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