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;课前回顾;教学目的和要求;第三节色谱分离法;根据物质吸附力差别可将吸附色谱分为以下几类:
物理吸附:无选择性,吸附与解吸可
逆,如硅胶、氧化铝
2.化学吸附:有选择性,吸附牢固
3.半化学吸附:介于上述二者之间,
如聚酰胺
;1、物理吸附:
(1)基本规律:“相似者易于吸附”
(2)基本特点:无选择性、可逆吸附、快速
(3)吸附力三要素:溶质极性;溶剂极性
吸附剂活性
(4)吸附过程:
;2、吸附剂:
(1)硅胶:弱酸性极性吸附剂;具有硅醇基,可形成氢键吸附;活性随含水量增大而降低(活化105℃30min)。适用于中性或弱酸性成分分离。
;(2)氧化铝;3、半化学吸附:聚酰胺(氢键缔合);(1)、影响因素:a、溶质的影响;b、溶剂的影响
洗脱能力:
水甲醇丙酮氢氧化钠水溶液甲酰胺二甲基酰胺尿素水溶液;4、化学吸附
(1)基本特点:有选择性、不可逆吸附
(2)基本原理:产生化学反应
1)酸性物质与Al2O3发生化学反应
2)碱性物质与硅胶发生化学反应
3)Al2O3容易发生结构的异构化
(3)应尽量避免
;(二)、分配色谱
1、原理:
利用物质在固定相和流动相之间分配系数不同而达到分离。
被分离物质两相溶剂中相对作逆流移动。
载体主要有:硅胶、硅藻土、纤维素粉等。;;(三)、离子交换色谱
根据物质解离程度不同进行分离
1、基本原理:
利用酸、碱化合物在解离状态时与阴、阳离子树脂产生离子交换的原理达到分离的方法。
2、三要素:
固定相(离子交换树脂)、溶质(被分离物)、洗脱剂
3、分离物质范围:
酸、碱类化合物
;中药碱性成分用阳离子交换树脂;酚、酸性成分用阴离子交换树脂,将交换后的树脂通过调整酸碱使吸附物游离,选择适当溶剂将吸附物溶解出即可。;;2、特性:
(1)、理化性质稳定,不溶于酸、
碱及有机溶剂。
(2)、对有机物选择性较好。
(3)、吸附速度快。
(4)、再生处理方便。
;3、吸附原理:
(1)、吸附性:???孔吸附树脂本身具有吸附性,是由范德华力或氢键吸附的结果。
(2)、筛性原理:是由大孔吸附树脂本身的多孔性所决定的。
;4、影响大孔吸附树脂分离效果的因素:
(1)、化合物分子极性大小:一般来说,大孔树脂的色谱行为具有反相的性质。被分离物质的极性大先流出色谱柱。
(2)、分子体积大小:在一定条件下,化合物体积越大,吸附力越强。
;;(五)、凝胶色谱法
凝胶色谱法又称分子排阻色谱法、凝胶滤过色谱法、分子筛色谱法等。是一种以凝胶为固定相分离分子大小不同成分的色谱方法。具有设备简单,操作方便,结果准确,凝胶可反复使用等优点,成为天然药物化学和生物化学研究中的常规分离分析方法。
;;小结;测评;作业
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