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核酸Nucleicaciddetectiontechnology核酸检测技术质粒的特性及应用
什么是质粒?质粒(plasmid)是存在于细菌染色体以外的,具有自主复制能力的环状闭合的双链DNA分子。
质粒的大小:4×106~100×106Da大质粒:含几百个基因,占染色体1%~10%小质粒:仅有20~30个基因,占染色体0.5%广泛存在于细菌内,也可存在于酵母菌或其他真菌体内
质粒的种类质粒的基因赋予细菌很多重要的生物学性状。按此可将质粒分为:PS:某些质粒可同时具有多种功能质粒种类编码产物作用耐药性质粒或R质粒决定细菌的耐药性致育性质粒或称F质粒编码性菌毛,介导细菌接合毒力质粒或Vi质粒编码与细菌致病性有关的毒力因子细菌素质粒编码各类细菌素代谢质粒编码与代谢有关的酶
质粒的特性①具有自我复制能力
质粒的特性②质粒DNA所编码的产物能赋予细菌某些特定的性状。
质粒的特性③质粒不是细菌生命活动所必需的物质,可自行丢失或经人工处理而消除。
质粒的特性④质粒具有转移性,可以在同种、同属的细菌内转移,也可以在不同种属间的细菌转移,其所携带的性状也随之转移。
质粒的特性⑤质粒可分为相容性和不相容性两种。
工程质粒的应用基因工程:利用DNA重组技术,将目的基因与载体DNA在体外进行重组,然后把这种重组DNA分子引入受体细胞,并使之增殖和表达的技术。由于质粒非常小,比较容易从细菌或酵母菌中完整地提取,因此基因工程为最常用的载体
基因工程的步骤
pBR322是第一种人工构建的载体,来自大肠杆菌,是分子生物学中最常用的一种质粒。现在已有pUC18/pUC19,pUC118/pUC119,pSP64/pUC65等众多质粒可作为基因工程载体基因工程质粒的应用,可解决一些合成成本高或分离纯化困难的药物的生产问题目前临床生产的有重组胰岛素、干扰素、乙肝表面抗原等,为一些疾病的治疗开辟了新的途径常用的基因工程质粒
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