有机物的分离与纯化方法.ppt

7、一般薄层色谱实验操作点样—展开—显色—计算Rf值点样：在距薄板下沿1cm处的水平线上，毛细管口液滴与薄层表面相切，切忌玻璃管戳破薄层，可以重复点样。展开：薄层板下沿水平插入层析缸，展开剂不能淹没样点，缸内充满展开剂蒸汽，要盖上盖子，展开剂水平线上升，接近薄层上沿时为止。显色：大多物质要进行物理或者化学方法显色。薄层板从层析缸取出，在展开剂前沿作一记号，待展开剂挥发干后显色。物理方法：紫外灯照射；碘蒸汽熏蒸等。化学方法：可以产生有色物质的反应。第37页,共49页，星期六，2024年，5月几种点样方法直接点样离下沿1.5-2.0cm处毛细管分次点样≤0.3cm。间接点样打孔器打滤纸片2-3mm直径，试液点满纸片，晾干；打孔器打薄层2-3mm的孔，纸片嵌入。试样液用打孔器打下的吸附剂吸收，干后填入孔中；薄层上挖一条水平沟槽，试样液用吸附剂吸收，干后填入沟槽（展开后是平行带状）第38页,共49页，星期六，2024年，5月8、等温吸附线与分离效果的关系恒温下以展开相浓度为横坐标，吸附相浓度为纵坐标作图，得到等温吸附曲线。曲线中，A物质斜率大，被吸附作用强，展开速度慢，Rf值小。Ⅰ是理想状况，显色后是标准圆斑；Ⅱ和Ⅲ出现“拖尾”现象，分离效果不好。、ⅠⅡⅢ第39页,共49页，星期六，2024年，5月9、影响Rf的因素薄层厚度吸附剂种类、活度、展开剂极性、展层的饱和度展开方法：一般不加黏合剂，薄板水平展开。单向上行一次展开，倾角70-80°Rf值接近的物质要多次单向展开。每次可用同一展开剂，也可不同的展开剂。双向展开法：用正方形薄板，展开剂一次走到上沿后取出风干，旋转90°后再展开边缘效应：溶剂前沿线一般朝下弯造成Rf不准，且使色斑大小及形状不规则显色是配合薄层进行鉴别。第40页,共49页，星期六，2024年，5月四、扫集共蒸馏法1、分离原理：将试样用注射器注入事先填入的无吸附性的填充剂（玻璃棉、玻璃珠、海砂等）的净化柱内，在规定温度下，有机化合物和溶剂蒸汽随氮气流进冷凝管，冷凝后进入接收器。脂肪、色素不能汽化的杂质沉积在柱内填充剂上，使杂质得以分离。2、用途：用于有机磷、有机氮有机化合物的分离提纯。3、构成部件：柱温箱、温度控制器、载气流量控制器、自动淋洗装置、净化柱、冷凝管、冷阱、收集器。第41页,共49页，星期六，2024年，5月五、低温冷冻分离法食品中有机化合物.的分析，取样后.有机化合物与大量的脂肪、蜡质混合在一起，给分离造成困难。由于动植物组织中的脂肪、蜡质可以在低温下于丙酮溶液中生成沉淀，将样品用丙酮反复萃取，萃取液经过冷冻，过滤而分离掉脂肪、蜡质沉淀，而有机化合物留在丙酮中。冷冻温度一般在-70℃第42页,共49页，星期六，2024年，5月六、液相萃取法1、萃取原理：一组互不相溶的溶剂中溶有某一成分溶质。这种溶质以一定比例（浓度比）在两相中分配。两相中分配比称分配系数。利用同组溶剂中各物质分配系数不同或同种物质在不同溶剂组中分配系数不同而分开。（选择合适溶剂，反复分配）2、等容一次分配：一组等容互不相溶的溶剂中加入某一溶质，平衡后弱极性溶剂中有机化合物比值是P；强极性溶剂中比值是Q;显然P+Q=1，两相浓度比为P/Q。第43页,共49页，星期六，2024年，5月3、等容多次分配与不等容分配取几份等体积强极性溶剂在1份弱极性溶剂中萃取几次后，弱极性溶剂中溶质含量是Pn,强极性溶剂中溶剂含量是1-Pn。不等容一次分配：设弱极性溶剂体积是强极性体积的α倍。依定义，一次分配后弱极性溶剂中含量是αP，强极性溶剂中含量为Q；弱极性溶剂中所含有机化合物占有机化合物总量比例为：αP/（Q+αP）。用此比例式可以计算两相的有机化合物含量。设P=0.7Q=0.3因两相浓度比不变。设0.7的相用2倍体积，则有0.7的液相中含有2×0.7/（0.3+2×0.7）=1.4/1.7第44页,共49页，星期六，2024年，5月七、化学提纯法化学净化法是使杂质与某种试剂发生化学反应除掉或者消除干扰。.有机化合物提取液干扰分析成分很大程度是脂肪与色素。最常用的化学净化法是用酸处理对酸稳定的有机化合物或用碱处理对碱稳定的有机化合物来除杂。1、酸净化：用浓H2SO4或浓H2SO4与发烟硫酸（1：1）混合液在分液漏斗中处理萃取液，可以除脂肪、色素。第45页,共49页，星期六，2024年，5月浓硫酸