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生物技术实践
[理清——学问联系]
[记清——主干术语]
1.制作果酒、果醋、腐乳、酸奶(泡菜)利用的微生物分别是酵母菌、醋酸菌、毛霉(主要)和乳酸菌,异化作用类型分别是兼性厌氧型、需氧型、需氧型、厌氧型。
2.制作果酒和果醋的试验流程:选择葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵。
3.制作果酒和果醋的发酵装置中充气口的作用是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气,排气口是在酒精发酵时排出CO2,出料口用来取样。
4.制作果酒时温度一般限制在18~25℃,时间为10~12d,前期需氧后期不需氧;制作果醋时温度限制在30~35℃,时间为7~8d,始终需氧。
5.毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
6.腐乳制作的试验流程:让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。
7.加盐腌制时间约为8d,配制卤汤中的酒的含量一般限制在12%左右。
8.用盐腌制时,留意限制盐的用量:盐的浓度过低,不足以抑制微生物的生长,可能导致豆腐腐败变质;盐的浓度过高会影响腐乳的口味。食盐的作用:抑制微生物的生长,避开腐败变质;析出水分,使豆腐变硬,在后期制作过程中不易酥烂;调味作用,给腐乳以必要的咸味;浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。
9.配制卤汤:卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的,干脆关系到腐乳的色、香、味。酒的作用:防止杂菌污染以防腐;与有机酸结合形成酯,给予腐乳风味;酒精含量的凹凸与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系,酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长;酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁殖快,豆腐易腐败,难以成块。
10.微生物培育基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源及生长因子等。
11.消毒指运用较为温柔的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌则是指运用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子。
12.制备固体培育基的步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等。
13.纯化微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,平板划线法可以分别微生物但不能对微生物进行计数,稀释涂布平板法既可分别微生物也可以对微生物进行计数。
14.平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基的表面。在数次划线后培育,可以分别到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。
15.稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基的表面,进行培育,即稀释涂布平板法一般分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。
16.对于频繁运用的菌种,可以采纳临时保藏的方法;对于须要长期保存的菌种,可以采纳甘油管藏的方法。
17.DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,在浓度0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。
18.DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质可溶于酒精,可利用冷却的酒精对提取的DNA进行纯化。
19.在鸡血细胞液中加入肯定量蒸馏水并用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液,可获得含DNA的滤液;切碎洋葱,加入肯定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液,可获得含DNA的滤液。
20.处理植物组织时须要进行研磨,其目的是裂开细胞壁,使核物质简洁溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量削减,影响试验结果,导致得不到丝状沉淀物。
21.用二苯胺鉴定DNA,在沸水浴的条件下呈现蓝色。
22.目前常用的加酶洗衣粉的酶制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶,其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。
23.探究加酶洗衣粉与一般洗衣粉洗涤效果的试验自变量是洗衣粉的种类;探究加酶洗衣粉洗涤的最佳温度条件试验的自变量是水的温度。
24.一般来说,酶更适合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶简洁从包埋材料中漏出。
25.酵母细胞固定化的步骤:酵母菌的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合→固定化酵母细胞。
26.假如制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,须要再作尝试。
[澄清——思维误区]
关注点1误认为兼性厌氧与“有氧、无氧”都一样
[澄清]酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,大量繁殖;在无氧条件下,进行无氧呼吸产生酒精和CO2,产生的酒精对其他微生物和酵母菌本身都具有毒害作用,所以在无氧条件下酵母菌不能大量繁殖。
关注点2误认为酿酒和酿醋所利用的微生
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