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丙二醛的测定--第1页
贵州大学
植物生理学综合性实验报告
题目：逆境对玉米生长的影响（丙二醛的测定）
学院：生命科学学院
专业：生物科学类
班级：生物102
学号：1007040161
姓名：袁晓玲
指导老师：罗睿
2012-6-21
丙二醛的测定--第1页
丙二醛的测定--第2页
题目：逆境对玉米生长的影响（丙二醛的测定）
一、前期处理：
在苗期对玉米进行处理，一共有四盆玉米苗，标号为A、B、C和D。其中A为对照组，
不做任何处理，只是每天浇25mL自来水；B盆：向其中喷洒草酸溶液；C盆：向其中喷洒
氢氧化钾溶液；D盆：向其中喷洒氯化钠溶液；B、C和D盆中喷洒的溶液浓度均为0.1mol/L，
并且每天喷洒25mL。
这样处理四天后，测量各个盆里玉米叶片的丙二醛的含量。
二、丙二醛含量的测定
1、实验目的
熟悉测定丙二醛（MDA）含量的常用的方法。
2、实验原理
植物器官在逆境条件下或衰老时，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是其产
物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反
应的强弱。
在酸碱和盐环境条件下，丙二醛可与巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的3，5,5—三甲
基噁唑—2,4—二酮，在532nm处有最大吸收波长。但该反应会受到可溶性糖的极大干扰，
糖与TBA的反应产物在532nm处也有吸收，但其最大的吸收波长在450处。
采用双组分分光光度计法可分别求出MDA和可溶性糖的含量。该法针对混合液中的两
个组分，它们的光谱吸收峰虽有明显的差异，但吸收曲线彼此又有些重叠，可根据Lambert
—Beer定律，通过代数方法，计算出一种组分由于另一种组分存在时对OD值的影响，最
后分别得到两种组分的含量。
3、器材与试剂
（1）实验仪器：分光光度计、研磨器、恒温水浴、试管、量筒、烧杯。
（2）实验试剂：三氯乙酸、石英砂、硫代巴比妥酸（TBA）溶液（用10%TCA配制0.6%
的TBA溶液）。
（3）实验材料：盆栽玉米。
4、实验步骤
（1）MDA的提取：取各个盆中玉米的叶片1g将其剪碎，加入10%三氯乙酸（TCA）2mL
和少量石英砂，研磨；进一步加入8mLTCA充分研磨，将匀浆液倒入试管中，静置20分钟，
然后提取上清液，上清液即为样品提取液。
（2）显色反应及测定：吸取2mL提取液，加入2mL0.6%TBA液，混匀，置于沸水浴中沸
煮15min，迅速冷却，静置。取上清液测定532nm和450nm处的OD值。对照管以2mL水
代替提取液。
（3）计算：根据Lambert—Beer定律，（以蔗糖为例）得
C=0.01171A
1450
-6-6
C=6.45×10×A—0.56×10×A
2532450
式中
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