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全反式维甲酸诱导小鼠间充质干细胞C3H10T12表达碱性磷酸酶

【摘要】目的分析全反式维甲酸对小鼠间充质干细胞C3H10T1/2表达碱

性磷酸酶的影响。方法全反式维甲酸(10-6M)、维甲酸核受体RAR的激动剂Ch55

与MAPK信号通路的阻滞剂处理C3H10T1/2细胞,钙钴染色检测碱性磷酸酶活性,

定量RT-PCR方法检测量效关系以及时相分布;采用萤光素酶报告基因检测碱性

磷酸酶的启动子是否接受维甲酸的调控。结果维甲酸处理C3H10T1/2细胞24h

即能够明显上调ALP的活性,具有明显的剂量依赖特性,与RAR有关,无MAPK信

号通路的参与,在其转录起始位点上游-512bp的范围内检测到核受体RAR的调控

位点。结论维甲酸能够通过核受体RAR直接上调碱性磷酸酶的转录水平。

【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectsofalltransretinoicacid(ATRA)

onthetranscriptionlevelofmouseembryonicmesenchymalstemcell

C3H10T1/2.MethodsC3H10T1/2weretreatedwithalltransretinoicacid(10-6M),

retinoicacidreceptor(RAR)agonistCh55andMAPKsignalpathwayinhibitor,

alkalinephosphatase(ALP)activityweremonitoredbyALPstaining,ALP

transcriptionlevelwereanalyzedbyquantitativeRT-PCR;Systemicpromoter

analysisbasedonLuciferasereporterassaywasundertakentosearchforALP

promoterregiontowhichRARbinds.ResultsATRAstimulatesALPactivity

significantlyin24h,whichisdosagedependentandrelevanttoRAR,andthe

potentialRARbindingsiteexistsinthe-512bpregionofALPpromoter.Conclusion

ATRAupregulatesALPexpressioninC3H10T1/2cellsmediatedbyRAR.

【Keywords】Alltransretinoicacid;Mesenchymalstemcell;Alkaline

phosphatase;Promoter

全反式维甲酸(alltransretinoicacid,ATRA)类物质是维生素A的衍生物,具有

广泛的生物学活性。正常情况下,由于软骨组织中大量分布各种RA的受体,RA对

于软骨分

化、骨发育甚至是骨的重建过程都有十分重要的作用;在病理情况下,RA摄

入与代谢的不平衡都可能导致软骨与骨组织的分化、发育异常甚至是畸形,改变

骨与软骨组织的正常结构,或形成骨质疏松。

维甲酸包括多种同分异构体,其中最重要的是13-顺式维甲酸(13-cRA)、全反

式维甲酸(ATRA)和9-顺式维甲酸(9-cRA)。维甲酸由胃肠道吸收后经氧化形成

ATRA,通过单纯弥散进入细胞。ATRA