CNAS-GL043-2020 兽医检测实验室ELISA试验测量不确定度评估指南.docxVIP

2020年03月01日发布2020年3月1日实施

CNAS-GL043

兽医检测实验室ELISA试验测量不确定度评估指南

GuidetotheEvaluationofUncertaintyinELISATestMeasurementinVeterinaryLaboratory

中国合格评定国家认可委员会

CNAS-GL043:2020第1页共7页

2020年03月01日发布2020年03月01日实施

兽医检测实验室ELISA试验测量不确定度评估指南

1、适用范围

本指南规定了兽医检测实验室对ELISA试验进行测量不确定度评估的“从上到下法”和“从下到上法”。

本指南适用于兽医检测实验室对ELISA进行测量不确定度的评估。

2、引用文件

下列文件中的条款通过引用而成为本文件的条款。以下引用的文件，注明日期的，仅引用的版本适用；未注明日期的，引用文件的必威体育精装版版本（包括任何修订）适用。

3.1CNAS—CL01《检测和校准实验室能力认可准则》

3.2CNAS-CL01-G003:2019《测量不确定度的要求》

3.3OIE《ManualofDiagnosticTestsandVaccineforTerrestrialAnimals》

(2019)：Chapter1.1.5“Qualitymanagementinveterinarytestinglaboratories”、

Chapter.2.2.4“Measurementuncertainty”

3、术语和定义

测量不确定度：与测量结果相关联的参数，表征合理地赋予被测量值的分散性。标准不确定度：以标准偏差表示的测量不确定度称为标准不确定度，以u表示。

扩展不确定度：确定测量结果区间的量，合理赋予被测量之值分布的大部分可望含于此区间。

不确定度的A类评定：对在规定测量条件下测得的量值用统计分析的方法进行的测量不确定度分量的评定。

不确定度的B类评定：用不同于测量不确定度A类评定的方法对测量不确定度分量进行的评定。

合成标准不确定度：当测量结果是由若干个其他量的值求得时，按其他各量的方差（和）协方差算得的标准不确定度。

自由度：在方差计算中，和的项数减去对和的限制数,符号为。

置信概率：与置信区间或统计包含区间有关的概率值（1-），为显著性水平。当测量值服从某分布时，落在某区间的概率P即为置信概率。置信概率是介于（0，1）之间的数，常用百分数表示。在不确定度评定中置信概率又称置信水准或置信水平。

包含因子：为获得扩展不确定度，而对合成标准不确定度所乘的数字因子。包含因子一般以K表示。置信概率为P时的包含因子用KP表示。

CNAS-GL043:2020第2页共7页

4、“从下到上法”/“影响因素分析法”评估ELISA测量不确定度的步骤

4.1确定ELISA试验检测结果不确定度来源

4.1.1A类不确定度因素

A类不确定度影响因素包括（但可能不限于）对被稀释后的被检血清或抗原的每个浓度进行的多个平行进检测引起的不确定度、不同人员之间不同检测同一样品引起的测量不确定度、标准样品引起的不确定度、不同品牌试剂用于同一血清进行引起的不确定度、被检样品/试剂盒存放条件引起的不确定度、采样是否正确及样品是否被污染引起的不确定度、样品运输和储存条件引起的不确定度、处理样品引起的不确定度、环境条件引起的不确定度、设备因素引起的不确定度、未知的随机因素引起的不确定度。

4.1.2B类不确定度影响因素

B类不确定度因素因素包括（但可能不限于）酶标仪的分辨力、孵育所用的恒温箱温度、加样器、天平、未知随机因素（如设备供电是否稳定、环境温度是否变化很大、试剂反复冷藏、人员身体状况等等）。

4.2影响ELISA试验检测结果各因素不确定度的评估

4.2.1A类因素的不确定度评估

对列出的A类不确定度影响因素，分别进行重复测量。对每个影响因素测量出的结果按照如下方式分别计算。

(1)计算所测量之值的平均值

=1nX