基因突变与DNA损伤修复.ppt

基因突变与DNA损伤修复要点：基因突变的相关概念、类型基因突变的机制基因突变的修复机制基因突变的检测12基因突变（genemutation）:基因的核苷酸顺序或数目发生改变。仅涉及DNA分子中单个碱基的改变称点突变（pointmutation）。涉及多个碱基的还有缺失、重复和插入。突变体(mutant)：具有突变表型的细胞或个体。13.1基因突变的概念、类别及性质（1）概念23145条件致死突变：在某一些条件下致死，而在另一些条件下成活的突变。致死突变：突变影响生物个体的生活力。分为显性致死和隐性致死。形态突变：突变影响生物的形态结构。生化突变：突变影响生物的代谢过程，导致一个特定生化功能的改变或丧失。从突变的表型:（2）突变类型从对遗传信息的改变:同义突变:碱基序列的改变没有引起产物氨基酸序列的改变,与密码子的简并性有关。无义突变:某个碱基的改变使代表某种氨基酸的密码子变成了终止密码子，使蛋白质合成提前终止，因而蛋白质产物一般是没有活性的。有些错义突变的产物仍有部分活性，使表型介于野生型与突变型之间的中间类型，称为渗漏突变。错义突变:碱基序列的改变引起了产物氨基酸序列的改变。有些错义突变严重影响蛋白质活性甚至完全无活性，从而影响了表现型。如果该基因是必须基因，则称为致死突变。有些错义突变不影响或基本上不影响蛋白质的活性，不表现明显的性状变化，称为中性突变。自发突变（spontaneousmutation）：在自然情况下发生的突变。诱发突变（inducedmutation）：人们有意识地利用物理、化学诱变因素引起的突变。③按其发生的原因:随机性：可发生在体细胞和生殖细胞中。01生殖细胞的突变频率高于体细胞。体细胞突变02在显性或纯合状态才能表现，出现嵌合体。03稀有性：突变率是很低的。04高等动植物10-5～10-8，细菌10-4～10-10，反应05了物种的基因的相对稳定性。06突变的性质07③可逆性

1)野生型基因突变型。2)回复突变率一般低于正突变率。

3)真正的回复突变很少发生。常被第二个位点的突变所抑制，抑制因子突变（suppressormutation）。

4)回复突变的有无是区别基因突变与染色体缺失或重复的标志。正突变回复突变突变的多方向性和复等位基因同一基因可突变为多个等位基因。突变的基因可以再突变。这一系列的等位基因就叫做复等位基因。这是由于同一座位内的不同位点上的结构发生变化产生的。突变的有害性和有利性。一般，有害突变多，有利突变少。eg.5-BU是胸腺嘧啶(T)的结构类似物，酮式结构易与A配对；烯醇式结构易与G配对。13.2.1碱基类似物13.2点突变的诱变机制A.T→A.5-BU（酮式）→G.5-BU（烯醇式）→G.CA.5-BUG.C→A.T2-AP是腺嘌呤的类似物，既可与T配对，也可与C配对。A.T→2-AP.T→2-AP.C→G.CG.C→2-AP.C→2-AP.T→A.T（1）烷化剂:甲磺酸乙酯(EMS)、亚硝基胍(NG)等。通过改变碱基结构使碱基错配。当G烷基化后可与T配对，导致碱基转换。G.C→A.T。或：烷化剂使嘌呤脱落，造成转换、颠换；DNA链的断裂或交联。13.2.2碱基改变嵌入剂eg.吖啶橙、吖啶黄素、原黄素等碱基对的类似物，易造成移码突变。13.2.3碱基损伤（1）紫外线：产生环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物。①双链间形成，阻碍DNA的复制。②同一链上相邻T间形成，阻碍碱基的正常配对和腺嘌呤的正常掺入，使复制在这个点上停止或错误进行，产生碱基顺序改变了的新链。（2）黄曲霉(B1)的作用使鸟嘌呤G脱落，SOS修复引入A,造成G.C→A.T。2.4基因的定点突变寡核苷酸诱导的基因定点突变将某基因克隆到载体上→人工合成含有突变位点的一对引物（突变位点位于引物中心附近，两端有足够的序列足以互补配对）→PCR扩增→DpnⅠ酶切→将突变DNA转入受体→筛选重组子。双引物法将某基因克隆到载体上→人工合成一对互补的含有突变碱基的引物→在基因的上游和下游各设计一个引物，分别与突变位置处的一个引物进行PCR扩增→两个PCR产物混合→延伸后就可获得有