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ISO15189实验室认可系列培训讲座
全自动生化分析仪的原理及检测方法
牛广华
辽宁中医药大学附属医院临床检验中心
自动生化分析仪的光学测定原理
ISO15189实验室认可系列培训讲座
一、光的性质
光是一种电磁波,具有波动性和微粒性,不同波长的光,能量不同。电磁辐射按其
波长可分为不同区域。
我们日常所见到的白光,便是波长在400-760nm之间的电磁波,它是由红、橙、黄、
绿、青、蓝、紫等色按照一定比例混合而成的复合光。
λ10-2nm10nm102nm104nm0.1cm10cm103cm
105cm紫红无
γx外外微线
射射光光波电
线线波
可见光
可见光:λ=400-750nm
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二、光的互补及有色物质的显色原理
若把某两种颜色的光按照一定的比例混合,能够得到白色光的话,则这两种颜
色的光就叫做互补色。图1中处于直线关系的两种光为互补色。如绿光和紫光为互补
色、黄光和蓝光为互补色等。
图1互补色光示意图图2高锰酸钾溶液的光吸收曲线
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自动生化分析仪的光学测定原理
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1.由于有色物质对光的吸收具有选择性,因此,在进行比
色测定时,只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光
线,即应该用单色光进行比色测定。
2.至于不被有色溶液吸收的光线。则应设法在未透过有色
溶液之前或之后将其消除掉。
3.滤光片就起这个作用。根据前面所叙述的理由可知,选
择滤光片的原则应是:滤光片的颜色应与待测溶液的颜色
为互补色。
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三、朗伯-比尔定律
当一束平行单色光照射到均匀、非散射的溶液时,
光的一部分被吸收,一部分透过溶液,一部分被比色皿
的表面所反射。设入射光的强度为Io,吸收光的强度Ia
,反射光的强度为Ir,透过光的强度为It。则它们之间
有如下关系:
Io=Ia+Ir+It
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在实际比色分析时,所用的比色皿都是同质料、同
规格的,因此反射光的强度为一定值,不会引起误差,
即反射光的影响可以不加考虑。这样,上式可简化为:
Io=Ia
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