植物体细胞杂交技术 (2).ppt

？？？？原理与方法操作水平研究目的分类细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。细胞生物学和分子生物学细胞水平或细胞器水平按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品植物细胞工程和动物细胞工程第2页,共25页，星期六，2024年，5月2.1.1植物组织培养技术第3页,共25页，星期六，2024年，5月一、细胞全能性1、概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。2、原因：细胞含有本物种全部遗传信息。3、条件：离体、适宜的环境条件。4、全能性的大小：受精卵生殖细胞体细胞1）＞植物细胞2）动物细胞3）分化程度高的细胞分化程度低的细胞＞＞＞第4页,共25页，星期六，2024年，5月一块组织要培养得到一株完整植株,应该如何操作呢?第5页,共25页，星期六，2024年，5月实验：胡萝卜的组织培养第6页,共25页，星期六，2024年，5月获取外植体无菌接种诱导愈伤组织的形成试管苗的形成扩大培养移栽脱分化再分化第7页,共25页，星期六，2024年，5月1、脱分化：已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化状态的过程，又称去分化。脱分化3、再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。再分化2、愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的一种无定形状态、高度液泡化、排列疏松无规则的薄壁细胞。结果：产生愈伤组织第8页,共25页，星期六，2024年，5月植物组织培养的概念：植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。第9页,共25页，星期六，2024年，5月愈伤组织根、芽或胚状体离体的器官、组织或细胞植物体生长发育脱分化再分化避光需光1、概念：2、原理：3、条件：4、过程：植物细胞具有全能性离体、无菌、一定的营养物质、激素（生长素，细胞分裂素等）、适宜的环境条件。二、植物组织培养技术第10页,共25页，星期六，2024年，5月二、植物体细胞杂交技术：因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？“Potamato”第11页,共25页，星期六，2024年，5月（一）定义：将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的过程。

二、植物体细胞杂交技术第12页,共25页，星期六，2024年，5月杂种细胞愈伤组织杂种植株植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B原生质体融合去壁去壁人工诱导再生壁脱分化再分化融合完成的标志植物组织培养（二）过程第13页,共25页，星期六，2024年，5月植物A细胞植物B细胞去壁原生质体A原生质体B原生质体融合融合体杂种细胞愈伤组织杂种植株再生壁脱分化再分化（二)过程第14页,共25页，星期六，2024年，5月1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？植物细胞外面有一层细胞壁，这层细胞壁阻碍着细胞间的杂交。2．有没有一种温和的去壁方法呢？纤维素酶和果胶酶去除细胞壁（酶解法）3、植物细胞去掉细胞壁后叫什么？原生质体4．为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？(细胞融合的基础)请思考：细胞膜具有一定的流动性第15页,共25页，星期六，2024年，5月7．如何将杂种细胞培育成杂种植株？5、人工诱导原生质体融合的方法有哪些？物理法：化学法：离心、振动、电激等聚已二醇（PEG）植物组织培育技术6．原生质体融合的标志是什么？产生新的细胞壁8．植物体细胞杂交技术完成的标志是什么？获得杂种植株方法第16页,共25页，星期六，2024年，5月(三）原理1）细胞膜的流动性2）植物细胞的全能性第17页,共25页，星期六，2024年，5月植物A细胞植物B细胞去壁原生质体A原生质体B原生质体融合融合体杂种细胞愈伤组织杂种植株（杂交完