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蛹虫草试管菌种检验规范

1范围

本文件规定了蛹虫草试管菌种质量的检验内容和方法以及抽样、检验规则等要求。本文件适用于蛹虫草试管菌种质量的检验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求GB/T2828.11计数抽样检验程序第11部分：小总体声称质量水平的评定程序GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

3术语和定义

GB/T12728-2006确立的以及以下列术语和定义适用于本文件。3.1

试管菌种tubestrain

以玻璃试管为培养容器和使用单位的菌种。3.2

母种stockculture

经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物,也称一级种。3.3

原种motherspawn

由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，移植、扩大次数不超过4代，也称二级种。3.4

生物学效率biologicalefficiency

单位质量培养料的风干物质所培养产生出的子实体或菌丝体质量（鲜重），常用百分数表示，如风干料100kg产生了新鲜子实体50kg，即为生物学效率50%。

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3.5

种性charactersofvariety

蛹虫草的品种特性是辨别蛹虫草菌种或品种优劣的重要标准之一。一般包括对温度、湿度、酸碱度、光线和氧气的要求，抗逆性、丰产性、出菇迟早、出菇潮数、栽培周期、商品质量及栽培习性等农艺性状。

4仪器设备与环境要求

4.1仪器设备

测用仪器设备有游标卡尺（量程150mm～300mm，精度0.1mm～0.01mm）、天平（规格0.1g-2000g）、高压灭菌锅（0.22MPa，116-134℃)或常压灭菌锅、净化工作台（100级@≥0.5μm）或接种箱（使用前6～12小时熏蒸灭菌）、恒温箱或培养箱（RT+10～300℃)、无菌操作室（每日常规消毒）、培养室、冰箱或冷库、显微镜（10-100倍）、放大镜（20倍）及常规用具。高压灭菌锅应使用经有资质部门生产与检验的安全合格产品。

4.2环境要求

无菌操作室宜小不宜大，一般10～20m2即可，一两台超净工作台为宜。要求封闭性好，干爽安静，洁净明亮；地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑；无菌操作室应配置拉动门及紫外线灭菌灯。

培养室大小根据要求而定，其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本要求能够控制光照和温度，并保持相对的无菌环境。为满足培养材料生长对气体需要，应安装排风窗和换气扇等换气装置，为节省能源和空间，应配置适宜的培养架，内置空调，并安装日光灯照明。每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要).紫外线照射消毒30-50min。

5抽样

抽样母种按品种、培养条件、接种时间分批编号；原种按菌种来源、制种方法和接种时间分批编号。应符合GB/T2828.11-2008中规定。按批抽取被检样品。

试管菌种抽样方案见附录A。

6检验内容和方法

6.1感官检测

6.1.1容器

肉眼观察母种或一级种试管有无破损。

6.1.2棉塞或胶塞

手触是否干燥；肉眼观察是否洁净，对光源仔细观察是否有粉状物；松紧度以手提起棉塞（或胶塞）或拔出棉塞（或胶塞）的状况检查；棉塞（或胶塞）透气性和滤菌性以及观察塞入试管口内或漏出试管口外棉塞（或胶塞）的长度检查。

6.1.3培养基贯入量

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肉眼观察培养基灌入量多少。

6.1.4斜面长度

用卡尺测量斜面顶端到试管口的距离。6.1.5接种量

用卡尺测量接种块大小。

6.1.6菌种外观及菌丝生长状态

肉眼观察菌丝生长量、菌丝体特征、菌丝表面状态、菌丝表面有无分泌物，菌落表面是否整齐，有无其他色泽及异常，必要时用5倍放大镜观察。

6.1.7气味

在无菌条件下拔出棉塞（或胶塞），将试管口置于距鼻5cm～10cm处，屏住呼吸，用清洗干净、酒精棉球擦拭过得手在试管口上方轻轻煽动，顺风鼻闻。

6.2菌种生物学检验

6.2.1杂菌和害虫

用放大倍数不低于10×40的光学显微镜对培养物的水封片进行观察，每一检样应观察